International Journal of Reproductive BioMedicine

en تأثیر ال-کارنیتین و پنتوکسی‌فیلین بر نگهداری طولانی مدت اسپرم انسان در شرایط بدون انجماد: یک مطالعه تجربی Effects of L-carnitine and pentoxifylline on long-term preservation of the human sperms: An experimental study Fertility & Infertility Original Article Original Article <div style="text-align: justify;">مقدمه: در مراکز ناباروری، نگهداری دراز مدت اسپرم با کیفیت بالا یک مسئله چالش برانگیز است. هدف: هدف از انجام مطالعه حاضر، نگهداری دراز مدت اسپرماتوزای انسان با افزودن ال-کارنیتین و پنتوکسیفیلین بدون استفاده از روشهای گرانقیمت انجماد است. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، 26 نمونه مایع منی نورموزواسپرمی با سن 34-28 سال به روش شناورسازی آماده و به سه قسمت تقسیم شد: گروه کنترل بدون تیمار، گروه ال-کارنیتین و گروه پنتوکسیفیلین. نمونهها در دمای oC 6-4 تا 12 ساعت نگهداری و تحرک اسپرم ارزیابی شد. درصد اسپرم‌های دارای DNA دو رشته‌ای، اسپرمهای آپوپتوتوز شده و اسپرم‌هایی با آکروزومی یکپارچه به ترتیب با ارزیابی ساختار کروماتین اسپرم، رنگآمیزی AnnexinV-PI و لکتین peanut agglutinin مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج: در روز هفتم، 26/4 ± 83/26% از اسپرمها در گروه پنتوکسیفیلین متحرک بودند که بطور معنیداری بیش از گروه ال-کارنیتین (61/0 ± 67/6%) و کنترل (17/0 ± 83/0%) بود (001/0 < p). در روز 12، در حالیکه همه اسپرمها در گروه ال-کارنیتین و کنترل تحرک خود را از دست داده بودند، افزودن پنتوکسیفیلین منجر به این شد که 47/0 ± 17/3% از اسپرمها تحرک خود را نگه دارند (001/0 < p). از آن گذشته، در روز 12، درصد اسپرمهای دچار اپوپتوز در گروه درمان شده با پنتوکسیفیلین (20/0 ± 8%) بطور معنیداری کمتر از گروه درمان شده با ال-کارنیتین (28/0 ± 9/5%) بود (03/0 = p). هیچکدام از    افزودنیها دارای اثر بر روی تعداد اسپرم با DNA دو رشتهای نبودند (05/0 > p). تا روز 12، ال-کارنیتین توانست یکپارچگی اکروزم را نگه دارد. نتیجه گیری: با وجود اینکه پنتوکسیفیلین تحرک اسپرم را بهبود بخشید، ال-کارنیتین در پیشگیری از آپوپتوز و واکنش آکروزومی کاراتر بود. گرچه بدون توجه به نوع درمان، DNA در برابر دناتوره شدن مقاوم بود.</div> <div style="text-align: justify;">Background: In infertility clinics, long-time preserving high-quality spermatozoa is a challenging problem. Objective: The present study aimed to prolong preserving of the human spermatozoa by adding pentoxifylline (PT) and L-carnitine (LC) without using high-cost freezing techniques. Materials and Methods: In this experimental study, semen samples of 26 normozoospermia men aged between 28-34 yr, were firstly prepared using the swim-up technique, and each sample was divided into the following 3 aliquots: untreated control group, the LC, and PT-treated groups. The samples were stored for up to 12 days at 4-6°C, and sperm motility was assessed. The percentages of the sperms with double-stranded DNA, apoptotic, and acrosomal interacted sperms were evaluated by <a href="https://www.google.com/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=&cad=rja&uact=8&ved=2ahUKEwiHtaqmgPD3AhVMhv0HHSVdC94QFnoECAwQAw&url=https%3A%2F%2Fpubmed.ncbi.nlm.nih.gov%2F22992911%2F&usg=AOvVaw2nhDNa9ajCLLsB2jTsYo0a" style="color:blue; text-decoration:underline">sperm chromatin structure assay,</a> AnnexinV-PI staining, and peanut agglutinin, respectively. Results: On day 7, 26.83% ± 4.26 of sperms were motile in the PT group which was significantly more than LC (6.67% ± 0.61) and control (0.83 ± 0.17) groups (p < 0.001). At day 12, while all sperms lost their motility in LC and control groups, adding PT led to 3.17% ± 0.47 sperms remaining motile (p < 0.001). Moreover, on day 12, the percent of apoptotic sperms in the PT-treated group (8% ± 0.20) was significantly lower than in LC-treated group (5.9% ± 0.28, p = 0.03). None of the additives positively affected the number of sperms with double-stranded DNA (p > 0.05). LC could also maintain acrosomal integrity over a storage time of up to 12 days. Conclusion: Despite PT's improved sperm motility, LC was more efficient in preventing apoptosis and acrosomal reactions. However, DNA was resistant to denaturation regardless of the treatments. </div> آپوپتوز, حرکت اسپرم, ال-کارنیتین, پنتوکسی فیلین, نگهداری منی. Apoptosis, Sperm motility, L-carnitine, Pentoxifylline, Semen preservation. 871 882 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-1634-2&slc_lang=en&sid=1 Elham Aliabadi aliabade@sums.ac.ir 0000-0002-5756-6166 No Department of Anatomy, School of Medicine, Shiraz University of Medical Sciences, Shiraz, Iran. Zohre Nateghian znateghian@yahoo.com 0000-0002-9536-4813 No Islamic Azad University of Isfahan (Khorasgan) Branch, Isfahan, Iran. Mohammad Hossein Nasr-Esfahani mh.nasr-esfahani@royaninstitute.org 0000-0003-1983-3435 No Department of Animal Biotechnology, Reproductive Biomedicine Research Center, Royan Institute for Biotechnology, ACECR, Isfahan, Iran. Marziyeh Tavalaee tavalaee.royan@gmail.com 0000-0001-9954-964x No Department of Animal Biotechnology, Reproductive Biomedicine Research Center, Royan Institute for Biotechnology, ACECR, Isfahan, Iran. Tahereh Talaei-Khozani talaeit@sums.ac.ir 0000-0002-8425-8871 Yes Histomorphometry and Stereology Research Center, Anatomy Department, School of Medicine, Shiraz University of Medical Sciences, Shiraz, Iran.