International Journal of Reproductive BioMedicine

en یک محور تنظیمی جدید hsa_circ_0070963/miR-223-3p/CCDC96–CCDC112 به عنوان یک نشانگر زیستی غیرتهاجمی برای پیش‌بینی نتایج بازیابی اسپرم در آزواسپرمی غیر انسدادی: یک مطالعه مورد-شاهدی A novel hsa_circ_0070963/miR-223-3p/CCDC96–CCDC112 regulatory axis as a non-invasive biomarker for predicting sperm retrieval outcomes in non-obstructive azoospermia: A case-control study Reproductive Genetics Original Article Original Article <div style="text-align: justify;">مقدمه: آزواسپرمی غیرانسدادی (NOA) یکی از شدیدترین انواع ناباروری مردان است. علیرغم پیشرفت در روش‌های جراحی برای بازیابی اسپرم که عمدتاً به دلیل فقدان نشانگرهای زیستی غیرتهاجمی قابل اعتماد برای پیش‌بینی نتیجه بازیابی اسپرم است، میزان موفقیت همچنان پایین است. مطالعات اخیر نقش تنظیمی ncRNAها را در اسپرماتوژنز آشکار کرده و فرصت‌های جدیدی را برای کشف نشانگرهای زیستی ارائه می‌دهد. هدف: این مطالعه با هدف شناسایی و اعتبارسنجی یک محور تنظیمی ceRNA جدید، hsa_circ_0070963/miR-223-3p/CCDC96–CCDC112، و ارزیابی پتانسیل آن به عنوان یک نشانگر زیستی غیرتهاجمی برای پیش‌بینی نتایج mTESE در بیماران مبتلا به NOA انجام شد. مواد و روش ها: 60 مرد مبتلا به NOA که تحت mTESE قرار گرفتند و 40 فرد بارور به عنوان گروه کنترل انتخاب شدند. بافت‌شناسی بیضه، بیماران NOA را به سندرم فقط سلول‌های سرتولی (SCOS)، هیپواسپرماتوژنز (HYPO) و توقف بلوغ (MA) طبقه‌بندی کرد. بیماران بیشتر به +NOA (بازیابی موفق اسپرم) و -NOA (بازیابی ناموفق) طبقه‌بندی شدند. RNA پلاسمای خون پس از شناسایی بیوانفورماتیکی شبکه‌های ceRNA کاندید، استخراج و تجزیه و تحلیل شد. سطح بیان CCDC96، CCDC112، hsa-miR-223-3p و hsa_circ_0070963 با استفاده از RT-qPCR کمی‌سازی شد. نتایج: هر دو CCDC96 و CCDC112 در نمونه‌های پلاسمای NOA در مقایسه با گروه کنترل به طور قابل توجهی کاهش بیان داشتند و بیشترین کاهش در بیماران -NOA مشاهده شد. برعکس، hsa-miR-223-3p در موارد NOA به طور قابل توجهی افزایش بیان داشت و بیشترین بیان را در موارد -NOA نشان داد. بیان hsa_circ_0070963 الگوی معکوسی را نشان داد و در NOA و به ویژه در بیماران -NOA به طور قابل توجهی کاهش یافت. تجزیه و تحلیل زیرگروهی نشان داد که گروه‌های HYPO و MA اختلال تنظیم شدیدتری نسبت به SCOS نشان دادند. تجزیه و تحلیل منحنی ROC عملکرد پیش‌بینی‌کننده عالی را نشان داد، به طوری که (983/0 = AUC) hsa_circ_0070963 و (970/0 = AUC)hsa-miR-223-3p  عملکرد بهتری نسبت به CCDC96 و CCDC112 داشتند. نتیجه گیری: محور hsa_circ_0070963/miR-223-3p/CCDC96-CCDC112 یک شبکه تنظیمی ceRNA جدید مرتبط با اسپرماتوژنز مختل در NOA را تشکیل می‌دهد. الگوی بیان آن نه تنها بینش‌های مکانیسمی در مورد نارسایی اسپرماتوژنز ارائه می‌دهد، بلکه نشانگر زیستی قوی و غیرتهاجمی برای پیش‌بینی نتایج mTESE نیز می‌باشد. این یافته‌ها می‌تواند به طبقه‌بندی بهتر بیماران و استراتژی‌های درمانی فردی در درمان ناباروری مردان کمک کند.</div> <div style="text-align: justify;">Background: Non-obstructive azoospermia (NOA) is a severe cause of male infertility. Testicular sperm extraction has limited success, largely due to the absence of reliable, non-invasive biomarkers to predict outcomes. Emerging evidence highlights the role of non-coding RNAs in spermatogenesis, providing promising targets for biomarker development. Objective: This study investigated the competing endogenous RNA regulatory axis hsa_circ_0070963/miR-223-3p/CCDC96–CCDC112 as a potential biomarker for predicting microsurgical testicular sperm extraction (micro-TESE) outcomes in NOA individuals. Materials and Methods: In this case-control study, 60 men with NOA undergoing micro-TESE and 40 fertile controls were recruited. Testicular histology categorized individuals into Sertoli cell-only syndrome, hypospermatogenesis, or maturation arrest. Individuals were further stratified into NOA⁺ (successful retrieval) and NOA⁻ (failed retrieval). Plasma RNA was extracted, and expression levels of candidate genes were measured by quantitative reverse transcription polymerase chain reaction.  Results: Findings demonstrated significant downregulation of CCDC96 and CCDC112 in NOA plasma, particularly in NOA⁻ individuals, while hsa-miR-223-3p was upregulated, with the highest expression in NOA⁻ cases. Conversely, hsa_circ_0070963 was markedly reduced in NOA, especially in NOA⁻ individuals. Dysregulation was more pronounced in hypospermatogenesis and maturation arrest compared to Sertoli cell-only syndrome. Receiver operating characteristic analysis revealed strong predictive accuracy, with hsa_circ_0070963 (area under the receiver operating characteristic curve = 0.983) and hsa-miR-223-3p (area under the curve = 0.970) outperforming CCDC96 and CCDC112.   Conclusion: The hsa_circ_0070963/miR-223-3p/CCDC96–CCDC112 axis represents a novel competing endogenous RNAs regulatory network linked to impaired spermatogenesis. Its expression profile provides mechanistic insights and serves as a robust, non-invasive biomarker for predicting micro-TESE outcomes, supporting improved stratification and individualized treatment strategies in male infertility.</div> آزواسپرمی, circRNA, miRNA. Azoospermia, circRNA, miRNA. 193 208 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-1094-1&slc_lang=en&sid=1 Emad Babakhanzadeh emad.babakhanzadeh71@gmail.com 0000-0003-3392-7999 No Department of Medical Genetics, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran. Ali Khodadadian a.khodadadian.ak@gmail.com 0000-0001-9192-2016 No Department of Medical Genetics, School of Medicine, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Majid Nazari vision.nazari@gmail.com 0000-0001-7971-5671 No Department of Medical Genetics, School of Medicine, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Mahya Mozhdeh mahya.mojdeh1992@gmail.com 0009-0002-3505-6189 No Department of Biology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran. Javad Fazeli javadfazeli926@gmail.com 0009-0008-2329-7464 No Department of Medical Genetics, School of Medicine, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Serajoddin Vahidi Vahidi.seraj@gmail.com 0009-0008-2329-7464 No Andrology Research Center, Yazd Reproductive Sciences Institute, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Mohammad Hassan Jafari mohammadhassanj@gmail.com 0000-0003-2999-3053 No Department of Medical Biotechnology, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Mohammadreza Dehghani dehghani.dr@gmail.com 0000-0001-5134-9438 No Department of Medical Genetics, School of Medicine, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Soudeh Ghafouri-Fard s.ghafourifard@sbmu.ac.ir 0000-0002-0223-499X Yes Department of Medical Genetics, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran. Nasrin Ghasemi nghasemi479@gmail.com; ghasemi@ssu.ac.ir 0000-0002-1103-6004 No Abortion Research Center, Yazd Reproductive Sciences Institute, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran.