Akyash F, Tahajjodi S S, Farashahi Yazd E, Hajizadeh-Tafti F, Sadeghian-Nodoushan F, Golzadeh J, et al . Derivation of new human embryonic stem cell lines (Yazd1-3) and their vitrification using Cryotech and Cryowin tools: A lab resources report. IJRM 2019; 17 (12) :891-906
URL:
http://ijrm.ir/article-1-1511-fa.html
تولید لاین های جدید سلول های بنیادی رویانی انسانی (یزد 1-3) و انجماد شیشه ای آنها با استفاده از ابزار کرایوتک و کرایووین: یک گزارش از منابع آزمایشگاهی. International Journal of Reproductive BioMedicine. 1398; 17 (12) :891-906
URL: http://ijrm.ir/article-1-1511-fa.html
چکیده: (3091 مشاهده)
مقدمه: فراهم کردن بانک سلولی در مراحل اولیه تکثیر سلولهای بنیادی رویانی انسانی نیازمند یک روش انجماد سلولی بهینه میباشد. انجماد شیشهای به عنوان یک روش بهینه در حفظ و ذخیره سلولهای زایا و رویان در روشهای کمک باروری مورد استفاده قرار میگیرد. همچنین انجماد شیشهای با استفاده از نیهای کشیده شده برای حفظ سلولهای بنیادی رویانی انسانی نیز استفاده شده است.
هدف: تولید و شناسایی لاینهای جدید سلولهای بنیادی رویانی انسانی و انجماد شیشهای آنها با استفاده از ابزار کرایوتک و کرایووین.
مواد و روش ها: با استفاده از روش کشت در قطرههای درمقیاس میکرو، لاینهای جدید سلولهای بنیادی رویانی انسانی بر روی لایه تغذیهکننده متشکل از سلولهای فیبروبلاست جنینی موشی تولید شدند، که بعدا بر روی دو نوع لایه تغذیهکننده موشی و انسانی (سلولهای فیبروبلاست جنینی موشی و سلولهای فیبروبلاست پوست ختنه انسانی) تکثیر پیدا کردند. برای تهیه بانک سلولی اصلی برای هر لاین سلولی 100 عدد از ابزار کرایوتک و کرایووین جهت انجماد شیشهای استفاده شد. همچنین فلاسکهای حاصل از تکثیر سلولهای بنیادی رویانی انسانی یزد با روش قدیمی انجماد آهسته ذخیره شدند.
نتایج: پرتوانی لاینهای سلولی یزد با استفاده از بررسی بیان ژنهای مرتبط با پرتوانی و شناساگرهای اختصاصی مورد ارزیابی قرار گرفت. توانایی تمایزی سلولها با استفاده از روش تشکیل اجسام شبه رویانی و همچنین روش کشت تک لایه و بررسی بیان ژنهای تمایزی مربوط به سه لایه جنینی و سلولهای زایا در سلولهای تمایز یافته مورد ارزیابی قرار گرفت. جهت بررسی محتوای کروموزومی سلولها از روش کاریوتایپ استفاده شد.
نتیجه گیری: ابزار کرایوتک و کرایووین مورد استفاده قرار گرفته جهت انجماد شیشهای در مراحل ابتدایی تولید لاینهای جدید سلولهای بنیادی رویانی انسانی ابزار مناسبی برای ذخیره این سلولها میباشند.