International Journal of Reproductive BioMedicine

en تأثیر سلول های پرده آمنیوتیک انسانی بر تمایز سلول های دندریتیک از منوسیت های خون محیطی: یک مطالعه تجربی The effect of human amniotic epithelial cell on dendritic cell differentiation of peripheral blood monocytes: An experimental study Reproductive Biology Original Article Original Article مقدمه: پرده آمنیون نقش مهمی را در حفظ یک حاملگی سالم بازی میکند. سلولهای اپیتلیال پرده آمنیوتیک انسانی از مهمترین جمعیتهای سلولی پرده آمنیون است که ویژگیهای ایمونومدولاتوری یا تعدیل سیستم ایمنی از خود نشان داده است. هدف: بررسی اینکه مجاورت سلولهای اپیتلیال پرده آمنیوتیک انسانی با مونوسیتها به تولید سلولهای دندریتیک تولروژنیک منجر میشود. مواد و روش ها: سلولهای اپیتلیال پرده آمنیوتیک از حاملگی نرمال استخراج شد. از منوسیتهای خون محیطی با روش MACS (سورتینگ سلولی) با آنتی CD14 جدا شد. منوسیتهای تخلیص شده در حضور اینترلوکین 4 و فاکتور محرک کلونی گرانولوسیت- مونوسیت در پلیتهای ترانس ول به منظور تمایز به سمت سلولهای دندریتیک نابالغ و بالغ در حضور و عدم حضور لیپوپلی ساکارید کشت داده شدند. بررسی ایمنوفنوتیپ سلولهای دندریتیک حاصل توسط فلوسایتومتری و سایتوکینهای تولید شده توسط الیزا انجام شد. بررسی عملکرد سلولهای دندریتیک حاصل توسط واکنش مختلط لوکوسیتی انجام شد. نتایج: بیان مارکرهای سطحی, CD14, CD1a, CD80, CD86, CD40, HLA-DR and CD83، ترشح سایتوکینهای IL12 و IL10، توانایی القای تکثیر لنفوسیتها در واکنش MLR و القای تولید سلولهای Treg در سلولهای دندریتیک مشتق از مونوسیت بین دو گروه تست و کنترل (عدم حضور   سلولهای اپیتلیال پرده آمنیون) اختلاف معنیداری نشان نداد. نتیجه گیری: فاکتورهای ترشحی از کشت سلولهای اپیتلیال پرده آمنیون قادر به القای تولید سلولهای دندریتیک تولروژنیک نیستند. انجام بررسیهای بیشتر جهت درک بهتر پیشنهاد میشود. Background: The amniotic membrane plays an important role in maintaining a healthy pregnancy. The main population cells from amniotic membrane include human amnion epithelial cells (hAECs) which have been shown to possess immunomodulatory properties. Objective: The proximity of hAECs with monocyte leads to the generation of tollerogenic dendritic cells. Materials and Methods: hAECs were obtained from normal pregnancy. Peripheral blood monocytes were isolated by anti-CD14 MACS method. Co-cultures of monocytes and hAECs were established in Transwell chambers supplemented with granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) and interleukin-4 (IL-4) in the absence and presence of lipopolysaccharide (LPS) to produce immature and mature DCs, respectively. Immunophenotyping of the obtained DCs was done through flow cytometry and the production of cytokines was measured by ELISA. Mixed leukocyte Reaction (MLR) was also performed for the functional assessment of DCs. Results: Immunophenotyping of [hAECs - Immature DC (iDC)] and [hAECs - iDC] + LPS cells revealed that the expression of CD1a, CD80, CD86, CD40, HLA-DR, and CD83 markers showed no significant difference as compared with the control group (iDCs and mDCs alone). In the [hAECs-iDCs] + LPS cells, the percentage of CD14 cells at the ratio of 1:2.5 showed significant differences compared to the control group. The production of IL-10 and IL-12 showed no significant difference in any of the cultures as compared to the control groups. Also, co-cultured DCs did not inhibit proliferation of lymphocyte. Conclusion: Our findings show that factors secreted from cultured hAECs are unable to generate of tollerogenic dendritic cells. To achieve a better understanding of other mechanisms more investigations are needed. پرده آمنیوتیک, سلول های دندریتیک, جفت انسانی, تعدیل ایمنی, مونوسیت. Amniotic membrane, Dendritic cells, Human placenta, Immunomodulation, Monocyte. 449 464 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-522-1&slc_lang=en&sid=1 Bahare Keshavarzi b.heaven65@yahoo.com 0000-0002-4246-7384 No Department of Immunology, School of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran. Meraj Tabatabaei meraj_tab82@yahoo.com 0000-0002-4749-1914 No Department of Immunology, School of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran. Amir Hasan Zarnani zarnania@gmail.com 0000-0003-4503-299X No Nanobiotechnology Research Center, Avicenna Research Institute, ACECR, Tehran, Iran. Fahime Ramezani Tehrani ramezani@endocrine.ac.ir 0000-0002-4609-065X No Reproductive Endocrinology Research Center, Research Institute for Endocrine Sciences, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran. Mahmood Bozorgmehr mahmood_b58@yahoo.com 0000-0002-2841-3750 No Nanobiotechnology Research Center, Avicenna Research Institute, ACECR, Tehran, Iran. Nariman. Mosaffa mosaffan@sbmu.ac.ir 0000-0003-1695-782X Yes Department of Immunology, School of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran.