International Journal of Reproductive BioMedicine

fa اثرات آنتی آپوپتوزی عصاره کالیگونوم بر سلول های بنیادی اسپرماتوگونی در محیط کشت In vitro antiapoptotic effects of the calligonum extract on spermatogonial stem cells Original Article Original Article مقدمه: سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی اساس اسپرماتوژنز و باروری مردان هستند. بنابراین حفظ و کشت آنها بسیار مهم است. هدف: در این مطالعه، ما اثرات حفاظتی کالیگونوم را بر روی بقا، آپوپتوز و بیان ژنهای آنتیآپوپتوزی سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی را، در محیط کشت ارزیابی کردیم. موارد و روشها: بعد از 24 ساعت از کشت، سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی با دوز 30 میکرومولار از H2O2 تیمار شدند و سپسμg/ml  10 از عصاره کالیگونوم را به مدت 3 هفته اضافه کردیم. بقا با تریپان بلو، آپوپتوز با استفاده از PI-Annexin و در نهایت بیان ژنهای Bax، Bcl-2 و P53 با Real-Time واکنش زنجیرهای پلیمراز ارزیابی گردید. نتایج: پس از 3 هفته از تیمار، بقا در گروه H2O2 بهمراه عصاره کالیگونوم، بصورت معنیداری (p=0/001) بالاتر از گروه تیمار با H2O2 به تنهایی بود. در گروه H2O2 به همراه عصاره کالیگونوم، آپوپتوز و همچنین بیان ژنهای آپوپتوزی Bax و P53 بطور معنیداری پایینتر از گروه تیمار با H2O2 به تنهایی بود. نتیجهگیری: نتایج این مطالعه نشان داد که دوز 30 میکرومولار از H2O2، آپوپتوز را افزایش میدهد اما بقا را در سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی کاهش      میدهد. کالیگونوم دارای خواص آنتیاکسیدانی است که میتواند آپوپتوز و بیان ژنهای Bax و P53 را کاهش دهد و بقا و بیان ژن Bcl-2 را افزایش دهد.    Background: Spermatogonial stem cells are the foundation of spermatogenesis and male fertility. So, their maintenance and culture are very important. Objective: In this study, we assessed protective effects of the Calligonum on in vitro viability and apoptotic and antiapoptotic genes expression of spermatogonial stem cells. Materials and Methods: After 24 hr of culture, the spermatogonial stem cells were treated with 30 μM dose of H2O2 and then 10 μg/ml the Calligonum extract was added for 3 wks. Viability was assessed by Trypan blue, apoptosis using PI-Annexin and finally Bax, Bcl-2 and P53 genes expression by Real-Time Polymerase chain reaction. Results: After 3 wk of treatment, viability in the Calligonum extract+H2O2 group was significantly higher than H2O2 group alone (p=0.001). In the Calligonum extract+H2O2 group, apoptosis, as well as expression of apoptotic genes (Bax and P53), was significantly lower than the group treated with H2O2 alone. Conclusion: The results of this study showed that 30 μM H2O2 increased apoptosis but decreased viability in spermatogonial stem cells. Calligonum has antioxidant properties that can reduce apoptosis, Bax and P53 expression and increase the viability and Bcl-2 expression. سلول بنیادی, آپوپتوز,کالیگونوم, بقا Stem cell, Apoptosis, Calligonum, Viability. 335 340 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-549-123&slc_lang=fa&sid=1 Shirin Barati شیرین براتی movahed.m@modares.ac.ir No Department of Anatomical Sciences, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran گروه آناتومی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران Mansoureh Movahedin منصوره موحدین movahed.m@modares.ac.ir 0000-0002-0767-6519 Yes Department of Anatomical Sciences, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran گروه آناتومی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران Hossien Batooli حسین بتولی movahed.m@modares.ac.ir No Kashan Research Station (Kashan Botanical Garden), Research Division of Natural Resources, Isfahan Agricultural and Natural Resources Research and Education Center, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Isfahan, Iran ایستگاه تحقیقات کاشان (باغ گیاه شناسی کاشان)، ﺑﺨﺶ ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت ﻣﻨﺎﺑﻊ ﻃﺒﯿﻌﯽ، ﻣﺮﮐﺰ ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت و آﻣﻮزش ﮐﺸﺎورزی و ﻣﻨﺎﺑﻊ ﻃﺒﯿﻌﯽ اﺻﻔﻬﺎن، ﺳﺎزﻣﺎن ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت، آﻣﻮزش و ﺗﺮویﺞ ﮐﺸﺎورزی، اصفهان، ایﺮان