International Journal of Reproductive BioMedicine
International Journal of Reproductive BioMedicine
IJRM
Medical Sciences
http://ijrm.ir
1
admin
2476-4108
2476-3772
10.29252/ijrm
en
jalali
1399
4
1
gregorian
2020
7
1
18
7
online
1
fulltext
en
اثر کپسول های آلژینیت به عنوان داربست سهبعدی بر سطح هورمون ها و بیان ژن ها در فولیکول-های پره آنترال موش در مقایسه با کشت دو بعدی؛ یک مطالعه تجربی
Effects of sodium alginate capsules as 3D scaffolds on hormones and genes expression in preantral follicles of mice compared to 2D medium: An experimental study
Reproductive Biology
Original Article
Original Article
<strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مقدمه: </span></span></strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">بهبود روش­های بلوغ آزمایشگاهی (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">IVM</span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">) که می­تواند رشد فولیکول را فعال کند نقش مهمی در تولید اووسیت­های بالغ در فناوری تولیدمثلی دارد.</span></span><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;"></span></span></span></strong><br>
<strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">هدف: </span></span></strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">ارزیابی غلظت­های مختلف داربست سه بعدی آلژینات در هورمون­ها و بیان ژن در فولیکول­های پره­آنترال.</span></span><br>
<strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مواد و روش ­ها:</span></span></strong> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">موش­های نابالغ سوری ماده نژاد</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">BALB/c</span></span> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> (سن 12 تا 14) کشته شدند. فولیکول</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;">­</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">ها را به روش مکانیکی جدا و به محیط کشت </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">α-MEM</span></span> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">حاوی %5</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">FBS</span></span> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> قرار داده شدند. فولیکول­های پره­آنترال را در غلظت­ های مختلف سدیم آلژنیت (25/0%, 5/0%, 1%) محیط کشت دو­بعدی به مدت 12 روز انکوبه شدند. فولیکول­ها پس از روز 10 کشت، به لحاظ تشکیل حفره آنترال و قطر فولیکول­ها در روزهای 6 و 12 مورد بررسی قرار داده شد. و در پایان روز 12 کشت سطح هورمون­ها (آنتی­مولرین هورمون، آندرستندیون، پروژسترون و استرادیول) و میزان بیان ژن­های (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">CYP11a1, CYP17a1, CYP19a1, AMH, GnRH</span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">) مورد بررسی قرار گرفتند.</span></span><br>
<strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتایج: </span></span></strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتایج نشان داد که بیشترین قطر فولیکول و بیشترین درصد تشکیل آنتروم مربوط به دوز 5/0% می­باشد (00/0</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">p = </span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">). سطح هورمون</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;">­</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">ها در دوزهای مختلف سدیم آلژینیت افزایش معنی</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;">­</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">داری در مقایسه با گروه </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">control</span></span> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">داشت (00/0 </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">p =</span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">). بیشترین میزان این هورمون­ها به ترتیب مربوط به دوز 5/0% و کمترین میزان هورمون­ها مربوط به محیط کشت دو­بعدی بود (00/0</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">p = </span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">). بیشترین میزان بیان ژن­ها مربوط به غلظت 5/0% می­باشد که افزایش معناداری را نسبت به گروه کنترل نشان می­دهد (00/0 </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">p =</span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">).</span></span><br>
<strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتیجه­ گیری: </span></span></strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">هیدروژل سدیم آلژینیت با دوز مناسب رشد فولیکول را ارتقا داده، باعث بلوغ فولیکول شده، منجر به تولید هورمون­های استروئیدی شده و منجر به افزایش بیان صحیح ژن­های مرتبط با استروئیدوژنز می­شود.</span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"></span></span><br>
<strong>Background</strong><strong>:</strong> The improvement of in vitro maturation methods, which can activate the preantral follicle growth, plays a crucial role in the production of mature oocytes in reproductive technology.<br>
<strong>Objective: To evaluate</strong> the different concentrations of 3D scaffolds of sodium alginate on hormones and gene expression in mice preantral follicles.<br>
<strong>Materials and Methods:</strong> Immature female BALB/c mice (12-14 days) were sacrificed. The follicles were removed mechanically and transferred into α minimal essential medium with 5% fetal bovine serum. The preantral follicles were incubated with different concentrations of sodium alginate (0.25%, 0.5%, and 1%) and 2D medium for 12 days. The follicles were examined for antral formation following the 10th day and the diameter on days 6<sup>th</sup> and 12<sup>th</sup>. The levels of hormones (AMH, androstenedione, 17β-estradiol, and progesterone) and the expression of genes (<em>CYP11a1</em>,<em> CYP17a1</em>,<em> CYP19a1</em>,<em> AMH</em>, and <em>GnRH</em>) at the end of the 12<sup>th</sup> day.<br>
<strong>Results:</strong> Maximum follicle diameter and highest percentage of antrum formation were related to 0.5% concentration (p = 0.00). The levels of hormones in different doses of sodium alginate were increased significantly compared to the control group (p = 0.00). The highest and lowest levels of these hormones were related to 0.5% concentration and 2D medium, respectively. The highest level of genes expression was observed in 0.5% sodium alginate, which showed a significant increase compared to the control group (p = 0.00).<br>
<strong>Conclusion:</strong> Proper concentration of alginate hydrogel increases follicle growth, causes follicle maturation, produces steroid hormones, and increases appropriate expression of steroidogenesis-related genes.<br>
<br>
فولیکول, کشت سهبعدی, سدیم آلژینات.
Follicle, Three-dimensional culture, Sodium alginate.
517
530
http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-641-1&slc_lang=en&sid=1
cyrus
jalili
cjalili@yahoo.com