en استفاده از پرده آمنیون به عنوان داربستی مناسب برای کشت و تمایز کندروژنیک سلول های بنیادی مشتق از بافت چربی: یک مطالعه تجربی Stem Cell & Cloning Original Article Original Article <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مقدمه: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">پرده آمنیون انسانی (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">HAM</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">) یک داربست مناسب و موثر برای کشت و انتقال سلول می</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;">&shy;</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">باشد. و سلول</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;">&shy;</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">های بنیادی مشتق از بافت چربی (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">ADSCs</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">) در بدن یکی از مهمترین منابع سلول بنیادی برای پیوند هستند. </span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">هدف: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">هدف از مطالعه حاضر ارزیابی قابلیت پرده آمنیون فریز شده به عنوان داربست برای تکثیر و تمایز سلول در شرایط </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">in vitro</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">می</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;">&shy;</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">باشد.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مواد و روش &shy;ها:</span></span></strong> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">در این مطالعه تجربی، نمونه های بافت چربی از ناحیه اینگوینال بیماران مرد با رنج سنی 30-15 سال جداسازی شد. به منظور تعیین هویت سلول</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;">&shy;</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">های بنیادی چربی از فلوسایتومتری برای شناسایی مارکرهای </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">CD31</span></span><span style="font-size:10.0pt;">، </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">CD45</span></span><span style="font-size:10.0pt;">، </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">CD90</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">CD105</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">استفاده شد. پرده آمنیون از جفت &nbsp;فرد دهنده بلافاصله پس از سزارین تهیه شد و پس از شستشو، تریپسینه کردن، و آسلولار کردن، از پرده آمنیون به عنوان داربست به 3 روش استفاده گردید: 1) سلول&shy;های بنیادی چربی به روش مونولایر و به مدت 14 روز در داخل فلاسک به کندروسیت تمایز یافته، سپس بر روی هر دو سمت پرده انتقال یافتند. 2) سلول&shy;های بنیادی بر روی هر دو سطح پرده آمنیون و به مدت 14 روز، کشت و تمایز کندروژنیک پیدا کردند (تمایز بر روی داربست). 3) تمایز کندروژنیک به مدت 14 روز و با تکنیک ریزتوده انجام شد، سپس بر روی پرده منتقل شد. در نهایت نمونه&shy;ها بصورت کیفی با ارزیابی هیستولوژیکی بررسی شدند.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتایج: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">فلوسیتومتری حضور سلولهای بنیادی مزانشیمی را تأیید کرد. یافته&shy;های هیستولوژیکی نشان داد که سلول&shy;ها اتصال و رشد بسیار خوبی بر روی سطح استرومایی پرده آمنیون داشته اند. از میان سه روش ذکر شده، تمایز بر روی داربست بهترین نتیجه را داشته است.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتیجه&shy; گیری: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">سلول&shy;های بنیادی بافت چربی اتصال، زیست&shy;پذیری و پتانسیل تمایزی مناسب و خوبی بر روی سطح استرومایی پرده آمنیون دارند. علاوه بر این، کشت و تمایز مستقیم </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">ADSC</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">بر روی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">HAM</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مناسب تر از کشت سلول های تمایز یافته بر روی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">HAM</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">است.</span></span> <strong>Background:</strong> The human amniotic membrane (HAM) is a suitable and effective scaffold for cell culture and delivery, and adipose-derived stem cells (ADSCs) are an important source of stem cells for transplantation and chondrogenic differentiation.<br> <strong>Objective:</strong> To assess the practicability of a cryopreserved HAM as a scaffold in cell proliferation and differentiation in vitro.<br> <strong>Materials and Methods:</strong> In this experimental study, adipose tissue samples were harvested from the inguinal region of male patients aged 15-30 years. Flow cytometry was used to identify CD31, CD45, CD90, and CD105 markers in adipose stem cells. HAM was harvested from donor placenta after cesarean section, washed, trypsin-based decellularized trypsinized decellularized, and used as a scaffold via three methods: 1) ADSCs were differentiated into chondrocytes on cell culture flasks (monolayer method), and after 14 days of culture, the cells were transferred and cultured on both sides of the HAM; 2) ADSCs were cultured and differentiated directly on both sides of the HAM for 14 days (scaffold-mediated differentiation); and 3) chondrocytes were differentiated with micromass culture for 14 days, transferred on HAM, and tissue slides were histologically analyzed qualitatively.<br> <strong>Results:</strong> Flow cytometry confirmed the presence of mesenchymal stem cells. Histological findings revealed that the cells adhered and grew well on the stromal layer of HAM. Among the three methods, scaffold-mediated differentiation of ADSCs showed the best results.<br> <strong>Conclusion:</strong> ADSCs have excellent attachment, viability, and differentiation capacity in the stromal side of HAM. Additionally, the direct culture and differentiation of ADSCs on HAM is more suitable than the culture of differentiated cells on HAM.<span dir="RTL"></span> پرده آمنیون, داربست, کندروژنزیز, تمایز, سلول بنیادی مزانشیمی Amniotic membrane, Scaffold, Chondrogenesis, Differentiation, Mesenchymal stem cell 21 32 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-539-2&slc_lang=en&sid=1 Hooman Zarei 0000-0001-8504-5360 Yes Department of Anatomy, Faculty of Medicine, Molecular and Cell Biology Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran. Student Research Committee, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran. Abbasali Karimpour 0000-0002-9649-2235 No Department of Anatomy, Faculty of Medicine, Molecular and Cell Biology Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran. Ali Reza Khalatbary 0000-0002-7686-2112 No Department of Anatomy, Faculty of Medicine, Molecular and Cell Biology Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran. Fereshteh Talebpour Amiri Ftaleb2001@yahoo.co.uk 0000-0001-9847-3401 No Department of Anatomy, Faculty of Medicine, Molecular and Cell Biology Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran.