en تبدیل آپوپتوز به نکروز و تغییرات متناظر آن در محیط اکسیداسیون سلول‌های زایای موش صحرایی نر تحت استرس گرمایی حاد: یک مطالعه ی تجربی Original Article Original Article <strong><span style="font-family:b mitramso-ascii-font-family:arial;"><span style="font-size:11.0pt;">مقدمه: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">افزایش دمای بیضه می&shy;تواند منجر به آسیب اسپرماتوژنز و در نتیجه ناباروری مردان شود. سلول&shy;های زایا که حساس به حرارت هستند، یکپارچگی ژنتیکی خود را از طریق مکانیزم محافظت از خود سلول یا از طریق مرگ سلول حفظ می&shy;کنند. با این حال، تمایز کیفی در مورد اینکه چگونه گونه&shy;های فعال اکسیژن و آنزیم&shy;های آنتی&shy;اکسیدان تنظیم مسیرهای سیگنالینگ آسیب سلولی، از جمله تجزیه </span></span><span dir="LTR">DNA</span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">در دماهای مختلف را تنظیم می&shy;کنند هنوز مورد بررسی قرار نگرفته است.</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;"></span></span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">هدف</span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">: این مطالعه به منظور تعیین تأثیر استرس اکسیداتیو وابسته به گرما بر روی سلول</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;">&shy;</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">های زایای جنس نر انجام شد. همچنین، تغییرات کیفی وابسته به زمان در مرگ سلول</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;">&shy;</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">های زایا مورد مطالعه قرار گرفت.</span></span><span dir="LTR"></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">موارد و روش&shy; ها:</span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> تعداد 30 سر موش صحرایی نر نژاد ویستار به صورت تصادفی به 5 گروه تقسیم شدند (6</span></span><span style="font-size:10.0pt;">=</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">n</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> در هر گروه) ، یعنی کنترل، 30، 45، 60 و 90 دقیقه با توجه به پروتکل درمان حرارتی. مطالعات کمی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">DNA</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">DNA</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نردبان همراه با پارامترهای بیوشیمیایی مختلفی نظیر پراکسیداسیون لیپید (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">LPO</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">)، گلوتاتیون، کاتالاز، سوپراکسید دیسموتاز (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">SOD</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">)، گلوتاتیون پراکسیداز (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">GSH-Px</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">)، گلوتاتیو ردوکتاز (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">GR</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">)، گلوتاتیون </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">s</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">ترانسفراز (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">GST</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">) انجام شد.</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;"></span></span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتایج: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">حیواناتی که تحت درمان گرمایی 30 دقیقه و 45 دقیقه قرار گرفتند، واکنش سیستمی و تدریجی به استرس گرمایی را نشان دادند. در حالی که حیوانات تحت درمان 60 دقیقه و 90 دقیقه، یک تغییر معمول و ناگهانی محیط داخلی سلول</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;">&shy;</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">های زایا را نشان دادند. به ترتیب آسیب </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">DNA laddering</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">smearing</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">در 30 و 45 دقیقه و 60 و 90 دقیقه تحت درمان با گرما دیده شد.</span></span><br> <strong><span dir="RTL"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتیجه&shy; گیری: </span></span></span></strong><span dir="RTL"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">با افزایش طول مدت درمان حرارت، میزان آپوپتوز به سطح مطلوبی رسیده و افزایش طول در معرض قرارگیری حرارت، حالت مرگ سلولی از آپوپتوز به نکروز را به طور ضمنی به علت حمله شدید اکسیداتیو تبدیل می</span></span></span><span style="font-family:arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;">&shy;</span></span><span dir="RTL"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">کند.</span></span></span> <strong>Background: </strong>Increased scrotal temperature can disrupt spermatogenesis leading to male infertility. Germ cells being heat sensitive maintain their genetic integrity via protective mechanism originated from the cell itself or by means of cell death. However, qualitative differentiation of how reactive oxygen species and antioxidant enzymes regulate signaling pathways of cellular damage including DNA fragmentation at varied temperatures remains unexplored. <strong>Objective:</strong> The study was designed to evaluate the effects of heat mediated oxidative stress on male germ cells. Also, the time-dependent qualitative variation in the germ cell death was studied.<br> <strong>Materials and Methods: </strong>Thirty male Wistar rats were randomly segregated into five major groups (n=6/each) i.e., Control, 30, 45, 60, and 90-min counterparts according to heat treatment protocol. Quantitation of DNA and DNA ladder studies was performed along with various biochemical parameter like lipid peroxidation (LPO), glutathione, catalase, superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-Px), glutatione reductase (GR), glutathione-s-transferase (GST).<br> <strong>Results:</strong> Animals receiving heat treatment for 30-min and 45-min revealed systematic and gradual response to heat stress; whereas, 60-min and 90-min treated animals showed a typical and abrupt change of the internal milieu of germ cells. Laddering and smearing effect of damaged DNA in 30 and 45 min and 60 and 90 min heat treated animals was seen respectively.<br> <strong>Conclusion: </strong>As the duration of heat treatment increases, the rate of apoptosis reaches an optimum level, and a further increase in the duration of heat treatment converted the mode of cell death from apoptosis to necrosis, implicitly due to severe oxidative attack. استرس گرما, آپوپتوز, نکروز, آنزیم‌های آنتیاکسیدان, تست. Heat stress, Apoptosis, Necrosis, Antioxidant enzymes, Testes 577 586 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-549-155&slc_lang=en&sid=1 Kuldeep Kaushik kaushik41738@yahoo.co.in 0000-0002-4707-0204 Yes Department of Zoology, Panjab University, Chandigarh, India Naveen Kaushal kaushik41738@yahoo.co.in No Department of Biophysics, Punjab University, Chandigarh, India Natwar Raj Kalla kaushik41738@yahoo.co.in No Department of Biophysics, Punjab University, Chandigarh, India