International Journal of Reproductive BioMedicine

en تغییرات اپیژنتیک و ظرفیت تکامل تخمک در طی روند بلوغ آزمایشگاهی با استفاده از عصاره هیدروالکلی سیاه دانه در موش های سالم و مدل تخمدان پلی کیستیک بهبود پیدا می کند: یک مطالعه تجربی Improvement in the epigenetic modification and development competence in PCOS mice oocytes by hydro-alcoholic extract of Nigella sativa during in-vitro maturation: An experimental study Reproductive Biology Original Article Original Article مقدمه: سیاهدانه و ماده موثره آن، تیموکوئینون، نقش محافظتی موثری در مدلهای حیوانی بیماریهای مختلف، خصوصا بیماری سندرم تخمدان پلیکیستیک (PCOS) دارد. هدف: این مطالعه به منظور بررسی تاثیر اثر سیاه دانه بر کیفیت تخمک در طی بلوغ آزمایشگاهی IVM طراحی گردیده است. مواد و روش ها: در این مطالعه تاثیر عصاره هیدروالکلی سیاه دانه (NSE) در غلظتهای مختلف (0، 1، 50 و 100) µg/ml بر میزان بلوغ، ظرفیت تکامل، استرس اکسیداتیو و تغییرات اپی ژنتیک تخمک در موشهای گروه کنترل و PCOS مورد بررسی قرار گرفت. نتایج: نتایج این مطالعه نشان داد که میزان بلوغ، لقاح و تشکیل بلاستوسیست در گروه 50 از NSE نسبت به سایر گروهها در هر دو موش کنترل و PCOS، به طور معنیداری بالاتر است. همچنین میزان بالای گلوتاتیون و بیان ژن گلوتاتیون پراکسیدار و کاهش میزان رادیکالهای آزاد اکسیژن (ROS) در تخمکهای گروه 50 مشاهده شد، که بیانگر کاهش میزان استرس اکسیداتیو در تخمکهای بالغ میباشد. همچنین افزایش میزان بیان ژنهای مرتبط با اپیژنتیک شامل آنزیم متیل ترانسفراز ژنوم (dnmt1) و استیل ترانسفراز هیستون (hdac1)، و ژنهای مادری مرتبط با بلوغ (Mapk, Cdk1) و کاهش میزان بیان ژن Cox2 در گروه 50 در مقایسه با سایر گروهها در هر دو موش کنترل و PCOS مشاهده شد. نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد که NSE تاثیر مثبتی بر بلوغ تخمک، استرس اکسیداتیو و تغییرات اپیژنتیک در طی روند IVM دارد و احتمالا از این طریق ظرفیت تکامل تخمک را در هر دو گروه موشهای کنترل و PCOS افزایش میدهد. Background: Nigella Sativa (NS) and its active component, thymoquinone, have beneficial protective effects on experimental animal models of polycystic ovary syndrome (PCOS) and different human diseases. Objective: The present study aimed to investigate the effects of NS hydro-alcoholic extract (NSE) on the oocyte quality of PCOS mice during in vitro maturation. Materials and Methods: For induction of PCOS, 40 prepubertal 21-days old female B6D2F1 mice (18-22 g body weight) received subcutaneous dehydroepiandrosterone daily. After validation of the model, germinal vesicle-stage oocytes of superovulated mice were collected and placed in the culture medium containing different concentrations (0, 1, 50, and 100 μg/ml) of NSE. For the measurement of developmental competency, some mature oocytes were fertilized with epididymal spermatozoa. Other mature oocytes were assessed for oxidative stress. Also, some mRNA expression levels involved in oocyte maturation and epigenetic modification were evaluated. Results: The 50 μg/ml NSE treated group showed significantly higher r ates o f maturation, f ertilization, and blastocyst formation in comparison with both control and PCOS groups. A high level of glutathione concentration and glutathione peroxidase mRNA expression, besides a low level of reactive oxygen species content all, were observed in oocytes treated with 50 μg/ml NSE, indicating the modification of oxidative statue. Furthermore, the oocytes in the 50 μg/ml-treated group showed an upregulation of mRNA expression in epigenetic-related genes (Dnmt1 and Hdac1) and maternally derived genes (Mapk and Cdk1), correspondingly downregulation of cyclooxygenase2 mRNA expression, in comparison to other groups. Conclusion: The results of this study indicated that 50 μg/ml NSE improves oocyte maturation, oxidative statues and epigenetic modifications. These may be the all reasons for the developmental competency in the control and PCOS mice oocytes. تغییرات اپی ژنتیک, بلوغ آزمایشگاهی تخمک, عصاره سیاه دانه, استرس اکسیداتیو, سندرم تخمدان پلی کیستیک. Epigenetic modification, In-vitro maturation, Nigella sativa, Oxidative stress, Polycystic ovary syndrome. 733 746 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-944-1&slc_lang=en&sid=1 Fatemeh Eini feini13@gmail.com 0000-0001-8165-5065 Yes Fertility and Infertility Research Center, Hormozgan University of Medical Sciences, Bandar Abbas, Iran. Khojasteh Joharchi Joharchi-kh@sbmu.ac.ir 0000-0001-8146-8200 No Department of Pharmacology, School of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran. Maryam Azizi Kutenaei maryamazizikut86@gmail.com 0000-0002-6042-8952 No Fertility and Infertility Research Center, Hormozgan University of Medical Sciences, Bandar Abbas, Iran. Pegah Mousavi pegahmousavi2017@gmail.com 0000-0002-5654-7561 No Fertility and Infertility Research Center, Hormozgan University of Medical Sciences, Bandar Abbas, Iran. Department of Medical Genetics, Faculty of Medicine, Hormozgan University of Medical Sciences, Bandar Abbas, Iran.