International Journal of Reproductive BioMedicine

fa بررسی اثر افزودن رزمارینیک و آسکوربیک اسید به محیط انجمادی تخمک‌های موش، بر میزان باروری آنها The effect of adding Rosmarinic and Ascorbic acids to vitrification media on fertilization rate of the mice oocyte: An experimental study Original Article Original Article مقدمه: انجماد تخمکها یک مرحله حیاتی برای گسترش و حفظ منابع ژنتیکی حیوانات است. تخمکها در طی پروسه انجماد از آسیبهای مورفولوژیکی و عملکردی قابل توجهی رنج میبرند. استرس اکسیداتیو یکی از عوارض نامطلوبی است که انجماد بر تخمکها اعمال میکند. هدف: در مطالعه ی حاضر، اثرات آنتیاکسیدانی اسید آسکوربیک و اسید رزمارینیک را بر کیفیت باروری تخمکهای موش فریز –دفریز شده مورد بررسی قرار دادهایم. موارد و روش ها: محلول پایه شامل پروپاندیول (7/5%) و اتیلن گلیکول (7/5%) بعنوان محیط تعادلی بوده و از پروپاندیول (15%)، اتیلن گلیکول (15%) و سوکروز نیم مولار بعنوان محیط انجمادی استفاده شد. در گروه اول (کنترل) هیچ ماده به محیط انجمادی افزوده نشد، در گروههای دوم و سوم به ترتیب نیم میلیمول اسید آسکوربیک و 105میکرومول اسید رزماری به محیط انجمادی افزوده گشت. در گروه چهارم ترکیب دوزهای مشابه اسیدرزماری و اسید آسکوربیک به محیط انجمادی اضافه گردید. تخمکهای موش برای مدت یک ماه در حالت انجماد حفظ شدند. نتایج: افزودن اسید آسکوربیک و اسید رزماری به محلول انجماد، بقا و بلوغ تخمکهای ژرمینال و نیز میزان لقاح و رشد به مرحله 4 سلولی را بهبود بخشید. اسید اسکوربیک موثرتر از اسید رزماری بوده و زمانی که این دو ماده به شکل ترکیبی به محیط انجمادی اضافه شدند اثرات مطلوبتری بر کیفیت و تکامل پس از انجماد جنین ها اعمال کردند. نتیجه گیری: این نتایج نشان میدهد که اضافه کردن غلظت تجمعی نیم میلیمول اسید آسکوربیک و 105میکرومول اسید رزماری به محیط انجمادی    تخمک های ژرمینال موش اثرات کیفی ارزشمندی بر بقاء و بلوغ آنها دارد. Background: Oocytes vitrification is a pivotal step for the widespread and safekeeping of animal genetic resources. Oocytes endure notable morphological and functional damage during cryopreservation. Oxidative stress is one of the adverse effects that vitrification imparts on oocytes. Objective: In the present study, we investigated the antioxidant effect of Rosmarinic and Ascorbic acids on the quality and fertilizing ability of frozen-thawed mice oocyte. Materials and Methods: In this experimental study, germinal vesicle oocytes obtained from two-months-old (30–40g) NMRI mice were randomly divided into four groups. The basic cryoprotectants were 7.5% (v/v) ethylene glycol+7.5% (v/v) Propanediol as an equilibration media. Vitrification medium contained 15% (v/v) ethylene glycol+15% (v/v) propanediol, and 0.5 M sucrose. In the first group (Control), nothing was added to vitrification mediums, whereas, in the second and third groups, 0.5 mmol/L of Ascorbic acid and 105 µmol/L of Rosmarinic acid were added into vitrification medium, respectively. The cumulative concentration of Rosmarinic and Ascorbic acids were added to group 4. Mouse oocytes were vitrified and preserved for one month. The thawed oocytes were transferred into the α-MEM medium (Alpha Minimum Essential Medium) and maintained in this medium for 24 hr, to be matured and reach the metaphase II stage. Results: The addition of Rosmarinic and Ascorbic acids to the vitrification solution improved the survival, maturation of Germinal vesicles, fertilization rate, and finally development to 4-cell stage. Maturation rates to 4-cell stage for Ascorbic acid, Rosmarinic acid, and both of them together were 80%, 80.76%, and 86.61%, respectively. Conclusion: These results indicate that the addition of a cumulative concentration of 0.5 mmol/L Ascorbic acid and 105 µmol/L of Rosmarinic acid to the cryopreservation solution for the mouse immature oocytes would be of significant value (p< 0.01). انجماد سریع, آنتی اکسیدان, باورری Vitrification, Antioxidant, Fertilization 195 200 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-549-294&slc_lang=fa&sid=1 Abdollah Borjizadeh عبدالله برجی‌زاده 0000-0002-3636-5058 No Department of Anatomy, Faculty of Medicine, Kurdistan University of Medical Sciences, Sanandaj, Iran. گروه آناتومی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی کردستان، سنندج، ایران Hamid Ahmadi حمید احمدی 0000-0001-6641-2460 No Department of Anatomy, Faculty of Medicine, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran. گروه آناتومی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران Erfan Daneshi عرفان دانشی 0000-0001-8265-2720 No Department of Anatomy, Faculty of Medicine, Kurdistan University of Medical Sciences, Sanandaj, Iran. گروه آناتومی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی کردستان، سنندج، ایران Daem Roshani دائم روشنی 0000-0003-4746-1114 No Social Determinants of Health Kurdistan Research Center, Kurdistan University of Medical Sciences, Sanandaj, Iran. گروه آمار، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی کردستان، سنندج، ایران Fardin Fathi فردین فتحی 0000-0002-4648-5598 No Cellular and Molecular Research Center, Kurdistan University of Medical Sciences, Sanandaj, Iran. مرکز سلولی ملکولی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی کردستان، سنندج، ایران Mahdad Abdi مهداد عبدی 0000-0003-2963-7657 No Department of Anatomy, Faculty of Medicine, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه آناتومی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران Sherko Nasseri شرکو ناصری 0000-0003-3113-7694 No Cellular and Molecular Research Center, Kurdistan University of Medical Sciences, Sanandaj, Iran. مرکز سلولی ملکولی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی کردستان، سنندج، ایران Morteza Abouzaripour مرتضی ابوذری‌پور Abouzary.M@muk.ac.ir 0000-0002-5073-4171 Yes Department of Anatomy, Faculty of Medicine, Kurdistan University of Medical Sciences, Sanandaj, Iran گروه آناتومی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی کردستان، سنندج، ایران