International Journal of Reproductive BioMedicine

en اثر محافظتی ملاتونین بر علیه آسیب بیضه توسط متوترکسایت در مدل موش صحرایی: یک مطالعه تجربی Protective effect of melatonin against methotrexate-induced testicular damage in the rat model: An experimental study Reproductive Biology Original Article Original Article مقدمه: نشان داده شده که متوترکسایت دارای اثرات سوِئی بر روی بیضه بخصوص اپیتلیوم سمینی فروس میباشد. همچنین نشان داده شده که ملاتونین که یک هورمون اندوکرین میباشد میتواند عملکرد بیضه را طبیعی کند لذا بهتر است توانایی ملاتونین در پیشگیری از عوارض ایجاد شده توسط متوترکسایت بر روی بیضه بررسی گردد. هدف: با توجه به اثرات آنتیاکسیدانی، ضد التهابی و ضد اپوپتوزیس ملاتونین، هدف این مطالعه بررسی اثر محافظتی ملاتونین بر علیه آسیب بیضه توسط متوترکسایت میباشد. مواد و روش ها: تعداد 40 موش صحرائی نر با وزن 200 تا 230 گرم به 5 گروه 8 تایی تقسیم شدند. به موشهای گروه 1 به عنوان گروه کنترل ماده بیاثر تزریق شد. به موشهای گروه 2  تزریق داخل صفاقی ملاتونین 8 میلیگرم به ازای هر کیلوگرم وزن بدن برای 15 روز متوالی انجام شد. به موشهای گروه 3 تزریق داخل وریدی ملاتونین 75 میلیگرم به ازای هر کیلوگرم وزن بدن برای 15 روز متوالی انجام شد. به موشهای دو گروه باقیمانده تزریق داخل صفاقی ملاتونین 8 میلیگرم به ازای هر کیلوگرم وزن بدن برای 15 روز متوالی (گروه 4) و 30 روز متوالی (گروه 5) انجام شد و سپس تزریق داخل وریدی ملاتونین 75 میلیگرم به ازای هر کیلوگرم وزن بدن در روزهای 8 و 15 مداخله انجام شد. پارامترهای تولیدمثل از جمله غلظت اسپرم اپیدیدمی، بیان پروتئین تیروزین فسفریله بیضوی، بیان پروتئین تنظیمکننده حاد استروئیدوژنیک (StAR) و کاسپاز 3 و سطح مالون دیالدئید مورد آزمایش قرار گرفتند. نتایج: غلظت اسپرم (ml/ 106×) در گروههای 4 (28/1±75/58) و 5 (57/2±93/55) به طور معنیداری (032/0p= ) در مقایسه با گروه 2 (14/2±92/32) بهبود یافته بود. اپیتلیوم سمینیفروس در گروههای 4 و 5 افزایش یافته بود در حالیکه بیان کاسپاز 3 کاهش یافته بود. در گروه درمان شده با ملاتونین در مقایسه با گروه متوترکسایت بیان پروتئین تیروزین فسفریله در 32 kDa کاهش و در 47 kDa افزایش یافته بود. بیان پروتئین StAR در گروههای مختلف تفاوتی را نشان نداد. نتیجه گیری: نتایج ما نشان داد که ملاتونین باعث بهبود غلظت اسپرم اپیدیدیمی به وسیله کاهش بیان کاسپاز 3 و افزایش بیان پروتئین تیروزین فسفریله در بیضههای آسیب دیده با متوترکسایت میشود. Background: Methotrexate (MTX) has been shown to affect the testes adversely, especially the seminiferous epithelium. As melatonin, an endocrine hormone, has been shown to normalize testicular function, its ability to prevent MTX-induced testicular damage should be considered. Objective: Based on the antioxidant, anti-inflammatory, and antiapoptotic activities of melatonin, this study aimed to investigate its protective effect against testicular damage induced by MTX. Materials and Methods: Forty adult male rats (200-230 g) were divided into five groups (n = 8/each). The rats in group I were injected with vehicle as a control. In group II, the rats were received intraperitoneal injections of melatonin (8 mg/kg) for 15 consecutive days. The rats in group III were intravenously injected with MTX (75 mg/kg) for 15 consecutive days. The remaining two groups received melatonin (8 mg/kgBW) for 15 (group IV) and 30 (group V) consecutive days, intraperitoneally, and then intravenously received MTX (75 mg/kgBW) on days 8 and 15 of the experimental period. Reproductive parameters, including epididymal sperm concentration, testicular tyrosine-phosphorylated protein expression, steroidogenic acute regulatory (StAR) protein expression, and caspase-3 and malondialdehyde levels, were examined. Results: The sperm concentrations (×106/ml) of groups IV (58.75 ± 1.28) and V (55.93 ± 2.57) were improved significantly (p = 0.032) compared with that of group II (32.92 ± 2.14). The seminiferous epithelium in groups IV and V also increased, while caspase-3 expression decreased. In the melatonin-treated groups, the expression of tyrosine-phosphorylated proteins at 32 kDa was decreased and that of proteins at 47 kDa was increased compared with the MTX group. StAR protein expression was not altered in any of the groups. Conclusion: Our results indicate that melatonin improves the epididymal sperm concentration by decreasing the expression of caspase-3 and increasing that of tyrosine-phosphorylated proteins in MTX-treated testes.   فسفوریلاسیون تیروزین, ملاتونین, بیضه, اسپرم, متوترکسات, کاسپاز 3, تیروزین. Melatonin, Testis, Sperm, Methotrexate, Caspase-3, Tyrosine phosphorylation 327 338 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-369-2&slc_lang=en&sid=1 Wannisa Sukhorum wannisa.suk@mfu.ac.th 0000-0003-3327-5636 No School of Medicine, Mae Fah Luang University, Chiang Rai, Thailand. Jariya Umka Welbat Jariya@kku.ac.th 0000-0002-2872-1542 No Department of Anatomy, Faculty of Medicine, Khon Kaen University, Khon Kaen, Thailand. Suchada Ktutsri suchada_pt34@gmail.com 0000-0002-9495-2509 No Sitthichai Iamsaard; Department of Anatomy, Faculty of Medicine, Khon Kaen University. 123 Mitraparp Road, Ampoe Muang, Khon Kaen 40002, Thailand. Sitthichai Iamsaard sittia@kku.ac.th 0000-0002-6793-2879 Yes Research Institute for Human High Performance and Health Promotion (HHP & HP), Khon Kaen, Thailand.