en هایپرمتیلاسیون پروموتور خانوده ژنی hsa-miR-449 در نمونه اسپرم مردان نابارور: مطالعه مورد -شاهد Reproductive Genetics Original Article Original Article <strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مقدمه: </span></span></strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">ریز </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">RNA</span></span> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">های دخیل در فرایند پس از بیان ژن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">(miRNAs)</span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> نقش مهمی را در مرحله پس از میتوز بازی می&shy;کنند. </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;"></span></span></span><br> <strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">هدف: </span></span></strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">در این زمینه میزان بیان و متیلاسیون پروموتور خانواده ژنی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">hsa-miR-449</span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> در نمونه اسپرم مردان نابارور مورد بررسی قرار گرفت. </span></span><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;"></span></span></span></strong><br> <strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مواد و روش&shy; ها: </span></span></strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">به منظور انجام این تحقیق مورد- شاهد 74 مرد نابارور (استنواسپرمیا، تراتواسپرمیا، استنو تراتواسپرمیا و اولیگو استنو تراتواسپرمیا) و 30 مرد بارور به عنوان کنترل انتخاب شدند. روش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Real time PCR</span></span> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">به منظور مطالعه میزان بیان و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">MSP-PCR</span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> به منظور مطالعه میزان متیلاسیون استفاده شد. </span></span><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;"></span></span></span></strong><br> <strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتایج: </span></span></strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">بیشترین میزان کاهش بیان در </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">hsa-miR-449-b</span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> و در بیماران اولیگواستنواسپرمیک بود (9/2 </span></span><span style="font-size:10.0pt;">= </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">F</span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">، 1000/0 </span></span><span style="font-size:10.0pt;">= </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">p</span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">). فراوانی متیلاسیون در پروموتور منطقه </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">hsa-miR-449 a, b, c</span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> در مردان نابارور بیشتر از مردان بارور بود (8/60% در برابر 3/23%) و بیشترین فراوانی متیلاسیون در نمونه&shy;های اولیگواستنواسپرمیا بود (2/81%). </span></span><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;"></span></span></span></strong><br> <strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتیجه&shy; گیری: </span></span></strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">کاهش بیان </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">has-miR-449 a, b, c</span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> و هایپرمتیلاسیون پروموتور آنها در نمونه اسپرم مردان نابارور مشاهده شد. یکی از دلایل کاهش بیان این ریز </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">RNA</span></span> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">ها می</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;">&shy;</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">تواند هایپرمتیلاسیون پروموتور این ژن&shy;ها باشد. کاهش بیان </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">has-miR-449</span></span> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">&nbsp;نشان دهنده نقص در اسپرماتوژنز می&shy;باشد.</span></span><br> &nbsp; <div style="text-align: justify;"><strong>Background:</strong> Post-transcriptional microRNAs (miRNAs) have a impotrant pattern in the spermatogenesis process.<br> <strong>Objective:</strong> Study of the expression and methylation of <em>hsa-miR-449</em> family in sperm samples of infertile men.<br> <strong>Materials and Methods:</strong> In this case-control study, we recruited 74 infertile men (with asthenozoospermia, teratozoospermia, asthenoteratozoospermia, and oligoasthenoteratozoospermia) and 30 control samles. Methylation-specific PCR (MSP) method was used for methylation evaluation of <em>hsa-miR-449</em> <em>a, b, c </em>promoter. By Real time PCR (qRT-PCR) method,we showed downregulation of <em>hsa-miR-449</em> <em>a, b, c</em> in the sperm samples of infertile men and compared it to their fertile counterparts.<br> <strong>Results:</strong> There was significant underexperssion, in <em>hsa-miR-449-b</em> in oligoasthenoteratospermic samples (p = 0.0001, F = 2.9). About the methylation pattern, infertile men showed high frequency of methylation in the promoter of <em>hsa-miR-449</em> <em>a, b, c</em> in comparison to controls (60.8% vs 23.3%), the highest amount of methylation was observed in oligoasthenoteratospermia samples (81.2%). <span dir="RTL"></span><br> <strong>Conclusion:</strong> In this study, low expression and high methylation of<em> hsa-miR-449-b</em> were observed in infertile men in compared to control samples, which can be one of the causes of defective spermatogenesis.<span dir="RTL"></span><br> <span dir="RTL"></span></div>   ناباروری مردان, خانوادهhsa-miR-449 , اپی ژنتیک. Spermatogenesis, miR-449, Expression, Epigenetic. 23 34 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-595-2&slc_lang=en&sid=1 Reza Najafipour rnajafipour@gmail.com 0000-0001-6042-8314 No Research Institute for Prevention of Non-Communicable Diseases, Cellular and Molecular Research Centre, Qazvin University of Medical Sciences, Qazvin, Iran. Abdolmabood Momeni amabood.momeni@gmail.com 0000-0002-2687-3454 No Biology Department, School of Basic Science, Arak University, Arak, Iran. Farideh Yousefipour dr.yousefipour@gmail.com 0000-0002-9873-914x No National Institute of Engineering and Biotechnology, Tehran, Iran. Shaghayegh Mousavi sh.mousavi@gmail.com 0000-0001-8641-4447 No Department of Molecular Medicine, School of Medicine, Qazvin University of Medical Sciences, Qazvin, Iran. Sahar Moghbelinejad smoghbelinejad@qums.ac.ir 0000-0002-7653-8689 Yes Research Institute for Prevention of Non-Communicable Diseases, Cellular and Molecular Research Centre, Qazvin University of Medical Sciences, Qazvin, Iran.