International Journal of Reproductive BioMedicine

en تأثیر بلوغ آزمایشگاهی تخمک در محیط حاوی تک nلایه سلول های آمپولای تازه و منجمد شده بر روی شایستگی تکاملی و بیان ژن‌های تخمک گاو Bovine oocyte developmental competence and gene expression following co-culturing with ampullary cells: An experimental study Assisted Reproductive Technologies Original Article Original Article مقدمه: اطلاعات کافی در زمینه تأثیر سلولهای اپیتلیال ناحیه آمپولای اوویداکت گاو بر ویژگیهای تکاملی تخمک وجود ندارد. هدف: هدف از مطالعه حاضر بررسی تأثیر کشت همزمان تخمک گاو و سلول‌های آمپولای تازه و منجمد شده بر ویژگیهای بلوغ تخمک و میزان لقاح آزمایشگاهی میباشد. مواد و روش ها: کمپلکسهای تخمک-کومولوس پس از جمعآوری به سه گروه تقسیم شدند. گروه کنترل: تخمکها به مدت 24 ساعت در محیط استاندارد بدون سلول کشت داده شدند، گروه تکلایه سلولی تازه و گروه تکلایه سلولی منجمد: در این گروهها تخمکها به مدت 18 ساعت در محیط استاندارد کشت داده شدند و سپس به محیط حاوی تکلایه سلولهای آمپولای تازه یا منجمد شده منتقل شده و به مدت 6 ساعت در این محیط کشت داده شدند. سلول‌ها از اویداکت گاوهای کشتاری استخراج و به صورت تازه یا منجمد شده استفاده شدند. پس از این زمان کمپلکسهای تخمک- کومولوس به لحاظ بلوغ آزمایشگاهی، بیان ژن (GDF9،STAR ، CASP3 و FSHr) و میزان لقاح آزمایشگاهی مورد ارزیابی قرار گرفتند. نتایج: نتایج مطالعه حاضر نشان داد که میزان بلوغ آزمایشگاهی در گروه تکلایه سلولی منجمد به شکل معنیداری بیشتر از گروه کنترل بود (02/0 =p ). میزان لقاح نیز در این گروه نسبت به گروه کنترل و گروه تکلایه سلولی تازه به شکل معنیداری بالاتر بود (به ترتیب با 05/0 = p و 03/0 = p). در ارتباط با تغییرات بیان ژنی، بیان ژن GDF9 در گروههای کشت همزمان با سلول به شکل معنیداری بالاتر از گروه کنترل بود (001/0 > p). همچنین بیان ژن StAR در گروه تکلایه سلولی منجمد به شکل معنیداری بالاتر از سایر گروهها بود (02/0 = p). نتیجه گیری: استفاده از کشت همزمان با سلولهای آمپولا برای بلوغ آزمایشگاهی تخمک باعث بهبود تکامل تخمک و بیان ژنهای مربوط به تکامل تخمک در گاو میشود.     <div style="text-align: justify;">Background: There is no sufficient information on the impact of bovine ampullary oviductal epithelial cells (BAOECs) on in vitro oocyte maturation competence and gene expression. Objective: This study aimed to examine the oocyte developmental competence following co-culturing with a monolayer of fresh and frozen-thawed ampullary cells. Materials and Methods: Bovine cumulus-oocyte complexes (COCs) were distributed into three groups: control group; where in COCs were cultured in cell-free media for 24 hr and FML and FTML groups in which the COCs were cultured in maturation media for 18 hr and then transferred into a media containing fresh and frozen-thawed BAOECs monolayer, respectively (BAOECs were extracted from the oviducts of slaughtered cattle and were then cultured freshly or frozen-thawed) for a further 6 hr. After 24 hr, the expanded COCs were evaluated for nuclear maturation, fertilization rate, and gene expression (GDF9, StAR, CASP3, and FSHr). Results: Nuclear maturation rate in the FTML group was significantly higher than the control group (p = 0.02). The fertilization rate of FTML group was significantly higher than the control and FML groups (p = 0.05 and p = 0.03, respectively). In terms of gene expression, GDF9 were upregulated in the presence of the BAOECs during the last 6 hr of the in vitro maturation (p < 0.001). Furthermore, the expression of the StAR gene in the FTML group was higher than the other groups (p = 0.02). Conclusion: Ampullary cells co-culturing (especially frozen-thawed cells) for in vitro maturation of bovine oocytes yields encourages the results and demonstrates the beneficial effect of co-culture on gene expression and developmental competence.  </div> بلوغ تخمک, بیان ژن, سلولهای اپیتلیال آمپولا, لقاح. Ampulla, Bovine, Fertilization, Gene expression, IVM. 371 380 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-1206-2&slc_lang=en&sid=1 Mehdi Azari dvm.azari@gmail.com 0000-0002-4156-6022 No Department of Anatomical Sciences, School of Medicine, AJA University of Medical Sciences, Tehran, Iran. Department of Animal Reproduction, School of Veterinary Medicine, Shiraz University, Shiraz, Iran. Mojtaba Kafi kafi@shirazu.ac.ir 0000-0002-7215-483x No Department of Animal Reproduction, School of Veterinary Medicine, Shiraz University, Shiraz, Iran. Anise Asaadi anise.asaadi@yahoo.com 0000-0003-2852-8352 No Department of Animal Reproduction, School of Veterinary Medicine, Shiraz University, Shiraz, Iran. Zohreh Pakniat zohre.pakniat72@gmail.com 0000-0001-9172-5522 No Department of Animal Reproduction, School of Veterinary Medicine, Shiraz University, Shiraz, Iran. Beheshteh Abouhamzeh b.abouhamzeh.ba@gmail.com 0000-0002-2424-5980 Yes Department of Anatomical Sciences, School of Medicine, AJA University of Medical Sciences, Tehran, Iran.