International Journal of Reproductive BioMedicine

en اثر محیط شرطی شده سلول های کومولوس انسانی روی بلوغ آزمایشگاهی اووسیت موش: یک مطالعه تجربی The effect of the human cumulus cells-conditioned medium on in vitro maturation of mouse oocyte: An experimental study Reproductive Biology Original Article Original Article <pre dir="RTL" style="text-align:justify;text-justify:inter-ideograph;direction:rtl;unicode-bidi:embed;"> مقدمه: برای افزایش نتایج درمان ناباروری، تلاشهای زیادی برای بهبود روشهای درمان انجام شده است. از آنجا که تکنیکهای کمکی تولیدمثل (ART) عمدتا از روشهای کشتسلولی استفاده میکنند، یکی از روشهای بهبود این فناوری، محیطهای شرطیشده حاصل از منابع و گونههای مختلف است. بهتر است به جای تحریک تخمکگذاری، از بلوغ آزمایشگاهی (IVM) استفاده و از تخمکهای چرخه طبیعی استفاده شود.</pre> هدف: در این مطالعه تأثیر محیط شرطیشده حاصل از سلولهای کومولوس انسانی (hCCCM) بر میزان IVM تخمکهای موش نابالغ و مورفولوژی آنها بررسی شده است. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، 240 تخمک مرحله ژرمینال وزیکول (GV) از موشهای 4 تا 6 هفتگی نژاد NMRI پس از 48 ساعت تزریق 5 واحد   PMSGجمعآوری شد. تخمکهای GV بدون کومولوس در hCCCM (گروه آزمون، 120 عدد) و DMEM + 20% FBS (گروه کنترل، 120 عدد) برای IVM کشت داده شدند. گروه کنترل شبیه گروه کنترلی است که در قسمت دیگر پروژه استفاده شده و اخیراً منتشر شده است. میزان IVM و تغییرات شکل و PVS در هر دو گروه آزمون و کنترل در 8، 16 و 24 ساعت بعد از کشت بررسی شدند. تخمکهای بالغ (MII) برای IVF استفاده شدند و میزان باروری بعد از 24، 48 و 72 ساعت ارزیابی شد. نتایج: تفاوت معنیداری بین میزان بلوغ در گروه hCCCM و کنترل (16/24% در مقابل 0%؛ 001/0 =p) مشاهده شد. همچنین در تغییرات مورفولوژیکی بین دو گروه تفاوت معنیداری مشاهده شد (05/0 =p و 04/0 =p). میزان تکوین تخمک های MII بدست آمده از IVM در گروهhCCCM  58/27 % (2 سلولی) و 89/6% (4 سلولی) بود. دادههای این مطالعه نشان داد که hCCCM یک محیط مؤثر برای بلوغ تخمکهای نابالغ در مقایسه با محیط کنترل است. نتیجه گیری: این یافتهها تأیید میکند که hCCCM از رشد و بلوغ آزمایشگاهی تخمک پشتیبانی میکند. علاوه بر این، hCCCM شکل تخمک و اندازه فضای پری ویتلین تخمک را تغییر میدهد. Background: To increase the results of infertility treatment, many efforts have been made to improve the treatment methods. As assisted reproductive technology is mainly using cell culture methods, one of the approaches to improve this technology is conditioned medium from different sources. It is desirable to apply in vitro maturation (IVM) and use oocytes from normal cycles instead of stimulating ovulation. Objective: To investigate the effect of human cumulus cell condition medium (hCCCM) on the IVM of immature mouse oocytes and morphology. Materials and Methods: In this experimental study, 240 germinal vesile oocytes were collected from four-six wk-old mice after 48 hr of 5IU pregnant mare serum gonadotropin (PMSG) injection and cultured in hCCCM (test group, n = 120) and DMEM + 20% FBS (control group, n = 120). The IVM rates and changes in perivitelline space (PVS) and shape were investigated at 8, 16, and 24 hr following the culture. The mature (MII) oocytes were subjected to in vitro fertilization (IVF) and the fertilization rate was assessed in three days. Results: A significant difference was observed between the maturation rates in the hCCCM and control groups (24.16% vs 0%; p = 0.001), as well as morphologic changes between the two groups (p = 0.04, p = 0.05). The development rate for MII oocytes attained from IVM in the hCCCM group was 27.58% (2-cell) and 6.89% (4-cell). Data displayed that hCCCM is an effective medium for oocytes maturation compared to the control medium. Conclusion: hCCCM supports oocyte in vitro growth and maturation. Moreover, hCCCM changes the oocyte shape and size of perivitelline space.  ژرمینال وزیکول, سلول کومولوس, محیط شرطی شده, باروری در شرایط آزمایشگاهی, بلوغ آزمایشگاهی, اووسیت. Germinal vesicle, Cumulus cell, Conditioned medium, In vitro fertilization, In vitro maturation, Oocyte. 1019 1028 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-588-3&slc_lang=en&sid=1 Maryam Adib maryam.adib2009@gmail.com 0000-0001-8148-4331 No Medical Biotechnology Research Center, Ashkezar Branch, Islamic Azad University, Ashkezar, Yazd, Iran. Seyed Morteza Seifati seifati@gmail.com 0000-0002-8505-5267 No Medical Biotechnology Research Center, Ashkezar Branch, Islamic Azad University, Ashkezar, Yazd, Iran. Mahmood Dehghani Ashkezari mdashkezary@yahoo.com 0000-0002-5349-2083 No Medical Biotechnology Research Center, Ashkezar Branch, Islamic Azad University, Ashkezar, Yazd, Iran. Arezoo Khoradmehr mehrarezoo@gmail.com 0000-0001-7460-1616 No Research and Clinical Center for Infertility, Yazd Reproductive Sciences Institute, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Roshan Rezaee-Ranjbar-Sardari Roshan_rezaee@yahoo.com 0000-0003-1968-1080 No Medical Biotechnology Research Center, Ashkezar Branch, Islamic Azad University, Ashkezar, Yazd, Iran. Somayyeh Sadat Tahajjodi s.tahajjodi@yahoo.com 0000-0001-7386-3753 No Stem Cell Biology Research Center, Yazd Reproductive Sciences Institute, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Research and Clinical Center for Infertility, Yazd Reproductive Sciences Institute, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Department of Reproductive Biology, School of Medicine, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Behrouz Aflatoonian b.aflatoonian@ssu.ac.ir 0000-0002-7250-9813 Yes Stem Cell Biology Research Center, Yazd Reproductive Sciences Institute, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Department of Reproductive Biology, School of Medicine, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Department of Advanced Medical Sciences and Technologies, School of Paramedicine, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran.