International Journal of Reproductive BioMedicine

en تجمع مجدد سلول های گرانولوزا-کومولوس طبیعی و تخمک های موش با سندروم تخمدان پلی کیستیک، در شرایط آزمایشگاهی: یک مطالعه تجربی The reaggregation of normal granulosa-cumulus cells and mouse oocytes with polycystic ovarian syndrome in vitro: An experimental study Reproductive Biology Original Article Original Article <div style="text-align: justify;">مقدمه: ارتباط بین تخمکها و سلولهای احاطهکننده آنها نقش عمدهای در جهت پیشرفت میوز و پتانسیل تکوینی تخمک ایفا می‌کنند. هدف: این مطالعه جهت ارزیابی اثر همکشتی سلولهای کومولوس-گرانولوزای طبیعی (GCCs: Granulosa cumulus cells) با تخمک‌ها از موشهایی با سندروم تخمدان پلیکیستیک (PCOS: Polycystic ovarian syndrome) طراحی شد. مواد و روش ها: سلولهای کومولوس-گرانولوزای طبیعی از ۱۰ موش NMRI ماده بالغ (۳۵-۳۰ گرم، ۸-۷ هفته) جمعآوری شد و در محیط کشت MEM-α تأمین شده با ۵% سرم جنین گاوی به مدت ۴۸-۲۴ ساعت کشت داده شدند ( cells/well۱۰۶×۱). سپس، تخمکهای حباب زاینده از موش‌هایی با سندروم تخمدان پلیکیستیک در حضور GCCs طبیعی کشت داده شده (گروه تجربی) و بدون حضور GCCs (گروه کنترل) کشت داده شدند. میزان بلوغ آزمایشگاهی و کیفیت تخمکهای PCOs به ‌وسیله ارزیابی بیان ژن TFAM (qReal Time-PCR) و Cx43 و ارتباط بین تخمکهای PCOs و GCCs طبیعی بعد از ۲۴ ساعت از کشت دنبال شد. نتایج: همکشتی GCCs طبیعی و تخمکهای PCOs در گروه تجربی کمپلکسی بنام کمپلکس  GCCsطبیعی-تخمک PCOs تشکیل داد. میزان بلوغ      این کمپلکسها بهطور معنیداری در مقایسه با گروه کنترل افزایش یافت (۰۰۱/۰ >p ). تفاوت معنیداری در بیان ژن‌های Cx43 (001/0 > p) و        TFAM (03/0 = p) در گروه تجربی در مقایسه با گروه کنترل پیدا شد. همچنین ارتباط بین تخمکهای PCOs و GCCs طبیعی در تصاویر میکروسکوپ الکترونی نگاره مشاهده شد. نتیجه گیری: همکشتی با GCCs طبیعی منجر به بهبود پتانسیل تخمکهای PCOs برای ورود به تقسیمات میوزی میشود که ممکن است منتج به بهبود تکنیکهای کمک باروری شود.   کلمات کلیدی: PCOs، همکشتی، سلولهای کومولوی گرانولوزا، IVM، Cx43.</div> <div style="text-align: justify;">Background: The dialogue between oocytes and their surrounding cells plays a major role in the progress of oocyte meiosis and their developmental potential. Objective: This study aimed to evaluate the effect of co-culture of normal granulosa-cumulus cells (GCCs) with oocytes from polycystic ovarian syndrome (PCOS) mice. Materials and Methods: Normal GCCs were collected from 10 virgin adult Naval Medical Research Institute female mice (30-35 gr, 7-8 wk old), and were cultured in an alpha-minimum essential medium supplemented with 5% fetal calf serum for 24-48 hr (1×106 cells/well). Then, germinal-vesicle oocytes from PCOS mice were cultured in the presence of cultured normal GCCs (experimental group) and without GCCs (control group). The maturation rate and quality of the PCOS oocytes were examined by evaluating TFAM and Cx43 gene expression (qReal Time-PCR) and the connection among PCOS oocytes and normal GCCs after 24 hr of culture. Results: The co-culture of normal GCCs and PCOS oocytes in the experimental group led to the formation of a complex called a PCOS oocyte-normal GCCs complex. The maturation rate of these complexes was significantly increased compared to that of the control group (p ≤ 0.001). A significant difference was also found in the expression of Cx43 (p ≤ 0.001) and TFAM (p < 0.05) genes in the experimental group compared with the control group. The connection between PCOS oocytes and normal GCCs was observed in the scanning electron microscope images. Conclusions: Co-culture with normal GCCs improves the capacity of PCOS oocytes to enter meiosis, which may result in the promotion of assisted reproduction techniques.</div> PCOs, همکشتی, سلولهای کومولوی گرانولوزا, IVM, Cx43. PCOS, Co-culture, Granulosa-cumulus cells, IVM, Cx43. 987 996 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-366-2&slc_lang=en&sid=1 Amaneh Moradi fmmf1372@gmail.com 0000-0001-8270-5618 No Department of Biology, Faculty of Sciences, University of Guilan, Rasht, Iran. Fatemeh Ghasemian ghasemian.21@gmail.com 0000-0001-9284-6545 Yes Department of Biology, Faculty of Sciences, University of Guilan, Rasht, Iran. Farhad Mashayekhi mashayekhi@guilan.ac.ir 0000-0001-7108-385X No Department of Biology, Faculty of Sciences, University of Guilan, Rasht, Iran.