International Journal of Reproductive BioMedicine

en تمایز سلول‌های بنیادی مزانشیمی مشتق از چربی انسانی به سلول‌های شبه زایایی نر با استفاده از سلول‌های سرتولی خرگوش: یک مطالعه تجربی Trans differentiating human adipose-derived mesenchymal stem cells into male germ-like cells utilizing Rabbit Sertoli cells: An experimental study Reproductive Genetics Original Article Original Article <div style="text-align: justify;">مقدمه: سلولهای بنیادی مزانشیمی (MSCs) به عنوان عوامل درمانی جدید بالقوه برای درمان ناباروری در نظر گرفته میشوند و بافت چربی (AT) به منبع بالقوه سلولهای بنیادی مزانشیمی تبدیل شده است. برای هدایت صحیح سلولهای بنیادی مزانشیمی در فرآیند تمایز، یک محیط مشابه با محیط in vivo ممکن است ضروری باشد. هدف: این مطالعه با هدف تمایز MSc مشتق از AT انسانی (hAD-MScs) به سلول‌های شبه زایایی نر در شرایط آزمایشگاهی با استفاده از ترکیبی از محیط تهیه ‌شده با سلول‌های سرتولی خرگوش (SCCM)، پروتئین مورفوژنتیک استخوان 4 و اسید رتینوئیک انجام شد. مواد و روش ها: MSc ها از  ATهای انسانی اهداکنندگان بارور و نابارور جداسازی شدند.  MScهای تأیید شده با استفاده از یک پروتکل 2 مرحلهای متمایز شدند. مرحله اول شامل ng/ml 20 پروتئین مورفوژنتیک استخوان 4 بود. مرحله دوم با استفاده از µm 1 رتینوئیک اسید و/یا SCCM انجام شد. تغییرات مورفولوژیکی و بیان نشانگرهای اختصاصی سلول زایا (GC) شامل فاکتور رونویسی باند اکتامر-4، تحریک شده توسط رتینوئیک اسید-8، پروتئین کمپلکس سیناپتونمال-3، و پروتامین-1 در سلولهای تیمار شده با استفاده از واکنش زنجیرهای پلیمراز کمی ارزیابی شدند. نتایج: القای hAD-MScs منجر به افزایش بیان ژن‌های اختصاصی GC شد که در این میان تیمار SCCM بالاترین میزان بیان را نشان داد. بیان ژنهای پروتئین-3 و پروتامین-1 کمپلکس سیناپتونمال به ترتیب پس از 19 و 26 روز از القاء شناسایی شد. PRM1 در hAD-MScs کشت شده در SCCM زودتر از سایر گروه‌های تیمار شده شناسایی شد. سلول‌های تیمار شده دوک‌های درازتری را نشان دادند و با هم توده‌هایی را تشکیل دادند. نتیجه گیری: hAD-MScs های تمایز یافته به دودمان GC توانایی بیان نشانگرهای اختصاصی GC را در شرایط آزمایشگاهی نشان دادند و سلول‌های سرتولی خرگوش را می‌توان برای القای تمایز hAD-MScs به سلول‌های شبه زایایی استفاده کرد.</div> <div style="text-align: justify;">Background: Mesenchymal stem cells (MSCs) are deemed as potential new therapeutic agents for infertility treatment and adipose tissue (AT) becomes a potential MSCs source. To direct MSCs through the differentiation process properly, an environment comparable to the in vivo niche might be indispensable. Objective: This study aims to differentiate human AT-derived MScs (hAD-MScs) into male germ-like cells in vitro using a combination of rabbit Sertoli cells conditioned medium (SCCM), bone morphogenetic protein 4, and retinoic acid. Materials and Methods: MScs were isolated from human ATs of fertile and infertile donors. The verified MScs were differentiated using a 2-step protocol; the first step included 20 ng/ml bone morphogenetic protein 4 treatment. The second step was performed utilizing 1 μM retinoic acid and/or SCCM. The morphological changes and the expression of germ cell (GC)-specific markers: octamer-binding transcription factor-4; stimulated by retinoic-acid-8, synaptonemal complex protein-3, and protamine-1 were assessed in the treated cells using quantitative polymerase chain reaction. Results: Induction of hAD-MScs resulted in the upregulation of GC-specific genes where SCCM treatment showed the highest expression. The synaptonemal complex protein-3 and protamine-1 gene expression was detected after 19 and 26 days of induction, respectively. PRM1 was detected in hAD-MScs cultured in SCCM earlier than in other treated groups. The treated cells became more elongated-like spindles and formed aggregates. Conclusion: hAD-MScs differentiated to GC lineage exhibited the ability to express GC-specific markers under in vitro conditions, and rabbit’s Sertoli cells can be used for inducing transdifferentiation of hAD-MScs into germ-like cells.</div> سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از بافت چربی, پروتئین مورفوژنتیک استخوان 4, سلول های زایا, رتینوئیک اسید, سلول های سرتولی. Adipose tissue-derived mesenchymal stem cell, Bone morphogenetic protein 4, Germ-line cells, Retinoic acid, Sertoli cells. 213 228 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-2301-1&slc_lang=en&sid=1 Alaa Mutee' Khudair akhudair@iugaza.edu.ps 0000-0003-3710-2580 No Medical Laboratory Sciences Department, Faculty of Health Sciences, Islamic University of Gaza, Gaza City, Palestine. Mazen Medhat Alzaharna mzaharna@iugaza.edu.ps 0000-0002-1111-958X Yes Medical Laboratory Sciences Department, Faculty of Health Sciences, Islamic University of Gaza, Gaza City, Palestine. Fadel Akram Sharif fsharif@iugaza.edu.ps 0000-0003-3849-0909 No Medical Laboratory Sciences Department, Faculty of Health Sciences, Islamic University of Gaza, Gaza City, Palestine.