International Journal of Reproductive BioMedicine
International Journal of Reproductive BioMedicine
IJRM
Medical Sciences
http://ijrm.ir
1
admin
2476-4108
2476-3772
10.29252/ijrm
en
jalali
1391
7
1
gregorian
2012
10
1
10
5
online
1
fulltext
en
میزان تشکیل بلاستوسیست پس از انجماد شیشه ای تخمک های نابالغ موش با استفاده از محلول تعادل گام به گام
The rate of blastocysts production following vitrification with step-wise equilibration of immature mouse oocytes
Original Article
Original Article
<strong><span style="background:white;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مقدمه:</span></span></span></strong> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">انجماد و بلوغ آزمایشگاهی تخمک روش مهمی در درمان ناباروری و حفظ باروری است که برای ایجاد یک بانک ژنتیکی برای گونه های جانوری در معرض انقراض یا گونه­ هایی که از نظر اقتصادی اهمیت دارند نیز پیشنهاد شده است. </span></span><span style="font-size:11.0pt;"></span><br>
<strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">هدف</span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">: هدف از این مطالعه</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">،</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> ارزیابی میزان زنده ماندن ، بلوغ و لقاح تخمک­های نارس موش پس از انجماد شیشه ای به روش تک مرحله ای و گام به گام بوده است.</span></span><span style="font-size:11.0pt;"></span><br>
<strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مواد و روش­ ها:</span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> تخمک ­های نارس از موش­های ماده با سن 4 هفته، 48 ساعت پس از تزریق داخل صفاقی </span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">5/7</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> واحد گنادوتروپین سرم مادیان حامله (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;">PMSG</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">) به دست آمدند. تخم ک­ها جمع­آوری شده قبل از انجماد شیشه ­ای در معرض محلول­های ضدیخ متشکل از 30% اتیلن گلیکول، 18% فیکول - 70، و 0/3 مول ساکارز بصورت تک مرحله­ای یا گام به گام قرار گرفتند. پس از انجماد و ذخیره ­سازی در نیتروژن مایع، تخمک­ها ذوب و دو بار در محیط کشت </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;">TCM199</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> شستشو داده شدند سپس جهت بلوغ آزمایشگاهی، لقاح و تکامل تا مرحله بلاستوسیست مورد استفاده قرار گرفتند.</span></span><br>
<strong><span style="background:white;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتایج: </span></span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">در گروه گام به گام میزان زنده ماندن تخمک ­ها پس از انجماد شیشه­ای و ذوب (88/96%)، میزان بلوغ (73/23%)، میزان لقاح (57/80%) و میزان رسیدن به مرحله بلاستوسیست (16/41%) بود که در تمامی موارد فوق بطور معنی ­داری بیشتر از گروه تک مرحله­ای بود (</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">0/001</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;">p<</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">). </span></span><span style="font-size:11.0pt;"></span><br>
<strong><span style="background:white;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتیجه­ گیری: </span></span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتایج این مطالعه نشان می­دهد که انجماد شیشه­ ای با روش گام به گام دارای اثرات مثبت بر بلوغ و ظرفیت رشد و نمو تخمک­ های ژرمینال وزیکول موش در مقایسه با روش تک مرحله ­ای است.</span></span><span style="font-size:11.0pt;"></span>
<strong>Background:</strong> Cryopreservation and in vitro maturation (IVM) of oocyte is becoming an important technique in infertility treatment and fertility preservation. Also it has been proposed to establish a genetic resource bank for endangered or commercially important animal species.<br>
<strong>Objective: </strong>The aim of this study was to evaluate viability, maturation and fertilization rate of mouse immature oocytes after single and stepwise vitrification procedure.<br>
<strong>Materials and Methods: </strong>Oocytes were obtained from 4 weeks old female mice 48h after intraperitoneal injection of 7.5 IU pregnant mare serum gonadotropin (PMSG). Collected oocytes before vitrification were exposed to cryoprotectant, which was composed of 30% (v/v) ethylene glycol, 18% (w/v) Ficoll-70, and 0.3 M sucrose, either by single step or in a step-wise way. After vitrification and storage in liquid nitrogen, the oocytes were warmed and washed two times in medium TCM199 and then subjected to IVM, fertilization and subsequent development to blastocysts.<br>
<strong>Results:</strong> The oocytes survival rates after vitrifying-warming (88.96%), maturation rate (73.23%), the capacity of fertilization (57.80%) and embryonic development to blastocyst (16.41%) in the step-wise exposure were significantly higher (p<0.001) compared with corresponding rate in the single step procedure.<br>
<strong>Conclusion: </strong>The results suggest that vitrification with step-wise procedure has positive effects on maturation and developmental capacity of mice germinal vesicle oocytes in compare with single step vitrification procedure.
انجماد شیشه ای, تخمک مرحله ژرمینال وزیکول ژرمینال, بلوغ آزمایشگاهی, موش.
Vitrification, Germinal Vesicle stage Oocyte, IVM, Mouse.
453
458
http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-31-84&slc_lang=en&sid=1
Reza
Mahmoudi
رضا
محمودی