International Journal of Reproductive BioMedicine

en محیط تحت تأثیر سلول‌های کومولوس تسهیل می‌کند تمایز سلول‌های زایا را از سلول‌های بنیادی رویانی انسانی: یک مطالعه آزمایشگاهی Cumulus cells conditioned medium facilitates germ cell differentiation from human embryonic stem cells: An experimental study Stem Cell & Cloning Original Article Original Article <div style="text-align: justify;">مقدمه: همانطور که پیش از این ثابت شده است، سلول‌های بنیادی رویانی انسانی (Human Embryonic Stem Cells; hESCs) می‌توانند به سلول‌های زایا تمایز پیدا کنند. این تمایز میتواند خودبخودی باشد و یا با اعمال فاکتورهای تعریف شده، روش همکشتی یا استفاده از محیط تحت تأثیر کشت سایر سلولها (در این مطالعه سلولهای کومولوس) هدایت شود. هدف: استفاده از سلولهای بنیادی رویانی یزد-4 (Yazd4; 46-XX) به منظور بررسی اثر محیط تحت تأثیر سلول‌های کومولوس انسانی (CCCM) بر ایجاد و رشد سلول‌های زایا در محیط آزمایشگاه. مواد و روش ها: در این مطالعه دو نوع محیط کشت متفاوت استفاده شد: محیط کشت FBS (fetal bovine serum) %20 + DMEM و محیط کشت اجسام شبه رویانی (embryoid bodies; EBs) که همان محیط کشت سلولهای پرتوان بنیادی رویانی انسانی (HES medium) بدون فاکتور رشد فیبروبلاستی بازی (bFGF) میباشد. بنابراین، این مطاله شامل دو گروه کنترل برای تمایز خودبخودی (spontaneous differentiation; SD) شامل:  SD-EB و SD-DM و همچنین دو گروه آزمایشی شامل: CCCM-EB و CCCM-DM است. نتایج: نتایج RT-qPCR و رنگآمیزی فلورسنت نشان داد که بین گروههای با محیط‌های کشت مشابه CCCM شرایط مناسبتری برای تمایز سلولهای زایا از سلول‌های بنیادی رویانی انسانی در شرایط آزمایشگاهی فراهم میکند. از طرف دیگر، مقایسه‌ی بین محیط‌های پایه نشان داد که محیط EB محیط     مناسبتری نسبت به محیط FBS %20 + DMEM است. نتیجه گیری: محیط کشت CCCM با محیط پایهی EB می‌تواند شرایط بهتری برای تمایز سلول‌های زایای ماده را از hESCs در محیط آزمایشگاه فراهم کند.</div> <div style="text-align: justify;">Background: Studies have shown that embryonic stem cells can differentiate into germ cells either spontaneously or directed by the defined factors or by applying a co-culture method or conditioned medium of stromal cells. Objective: Here, Yazd4 (human embryonic stem cells [hESC] line; 46, XX) was used to evaluate the effect of human cumulus cells conditioned medium (CCCM) on in vitro germ cell production and development. Materials and Methods: In this experimental study 2 different complete media were applied, Dulbecco’s modified eagle’s medium + 20% fetal bovin serum and embryoid body (EB) medium (KnockOut serum replacement- hESC without basal fibroblast growth factor). Thus, there are 2 control groups for spontaneous differentiation (SD) (SD-EB and SD-DM) and 2 types of CCCM (CCCM-DM and CCCM-EB) as test groups. 40% dilution of the conditioned medium was applied according to previous reports. Results: Reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction and immunofluorescent staining assays revealed that between groups with similar complete medium, CCCM provides a better condition for in vitro germ cell differentiation from hESCs. Moreover, a comparison between the 2 types of complete media showed that EB medium is more supportive than Dulbecco’s modified eagle’s medium +20% fetal bovin serum. Conclusion: CCCM with EB medium as a complete medium provides a better condition for in vitro germ cell differentiation from hESCs.</div> <div style="text-align: center;">This article has been extracted from Ph.D. Thesis. (Somayyeh Sadat Tahajjodi)</div> سلول‌های کومولوس, محیط تحت تأثیر, گامتوژنز در محیط آزمایشگاهی, سلول‌های بنیادی رویانی انسانی, سلول‌های زایا. Cumulus cells, Conditioned medium, In vitro gametogenesis (IVG), Human embryonic stem cells, Female germ cells. 33 44 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-588-6&slc_lang=en&sid=1 Somayyeh Sadat Tahajjodi s.tahajjodi@gmail.com 0000-0001-7386-3753 No 1. Stem Cell Biology Research Center, Yazd Reproductive Sciences Institute, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. 2. Research and Clinical Center for Infertility, Yazd Reproductive Sciences Institute, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. 3. Department of Reproductive Biology, School of Medicine, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Ehsan Farashahi Yazd ehsanfarashahi@yahoo.com 0000-0003-1122-0626 No 1. Stem Cell Biology Research Center, Yazd Reproductive Sciences Institute, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. 2. Research and Clinical Center for Infertility, Yazd Reproductive Sciences Institute, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. 3. Department of Reproductive Biology, School of Medicine, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Azam Agharahimi 63rahimi@gmail.com 0000-0002-7579-6192 No Research and Clinical Center for Infertility, Yazd Reproductive Sciences Institute, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Fatemeh Akyash fakyash@gmail.com 0000-0003-1277-4858 No 1. Stem Cell Biology Research Center, Yazd Reproductive Sciences Institute, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. 2. Research and Clinical Center for Infertility, Yazd Reproductive Sciences Institute, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. 3. Department of Reproductive Biology, School of Medicine, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Fatemeh Hajizadeh-Tafti fhajizade69@yahoo.com 0000-0003-3067-0534 No Stem Cell Biology Research Center, Yazd Reproductive Sciences Institute, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Jalal Golzadeh r.aflatoonian@gmail.com 0000-0002-3425-9526 No Stem Cell Biology Research Center, Yazd Reproductive Sciences Institute, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Reza Aflatoonian 0000-0002-8570-583X No Department of Endocrinology and Female Infertility, Reproductive Biomedicine Research Centre, Royan Institute for Reproductive Biomedicine, Tehran, Iran. Behrouz Aflatoonian b.aflatoonian@ssu.ac.ir 0000-0002-7250-9813 Yes 1. Stem Cell Biology Research Center, Yazd Reproductive Sciences Institute, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. 2. Research and Clinical Center for Infertility, Yazd Reproductive Sciences Institute, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. 3. Department of Reproductive Biology, School of Medicine, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran.