en اثر ملاتونین در جریان مراحل مختلف بلوغ تخمک و متعاقبا تکوین جنین در موش ها Original Article Original Article <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مقدمه:</span></span></strong> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">حفاظت تخمک ها و جنین ها از فشار اکسیداتیو موجود در محیط کشت بسیار مهم است. تاثیر ملاتونین به عنوان یک پاک کننده مستقیم رادیکال آزاد مشاهده شده است. </span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">هدف:</span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> در این مطالعه، تاثیر ملاتونین در طول بلوغ آمایشگاهی تخمک، لقاح آزمایشگاهی و تکوین جنین های حاصل از تخمک های موش ارزیابی شد. </span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مواد و روش&shy;ها: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">تخمک های حاصل از موش های تحریک شده جهت تخمک گذاری به دو گروه تقسیم گردید: مجموعه تخمک-کومولوس (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;">COCs</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">، گروه </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;">I</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">) و مجموعه تخمک-کومولوس برهنه شده (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;">d-COCs</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">، گروه </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;">II</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">). تخمک ها در محیط بلوغ همراه با غلظت های مختلف ملاتونین (10⁵-10¹ &times; 1 نانو مولار) کشت داده شدند. گسترش کومولوس و وضعیت هسته ای بعد از 24 ساعت از بلوغ آزمایشگاهی ارزیابی گردید. سپس تخمک ها برای لقاح آزمایشگاهی (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;">IVF</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">) استفاده و تخمک های لقاح یافته در محیط تامین شده با غلظت های مختلف ملاتونین کشت داده شدند.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11pt;">نتایج: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11pt;">میزان گسترش (%86/79) و بلوغ (%80/55) مجموعه تخمک-کومولوس در محیط تامین شده با 10 نانومولار از ملاتونین در مقایسه با گروه کنترل&nbsp;</span></span><span dir="RTL"></span><span dir="RTL"></span><span dir="RTL" lang="FA" style="font-size: 11pt; font-family: 'B Mitra'; "><span dir="RTL"></span><span dir="RTL"></span>(%73/33</span><span dir="LTR"></span><span dir="LTR"></span><span style="font-size: 11pt; font-family: 'Times New Roman', serif; "><span dir="LTR"></span><span dir="LTR"></span>&nbsp;)</span><span dir="RTL" lang="FA" style="font-size: 11pt; font-family: 'B Mitra'; ">،&nbsp;</span><font face="Times New Roman, serif"><span style="font-size: 14.545454025268555px;">(p=0/006 و p=0/026 به ترتیب)</span></font><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11pt;">&nbsp;افزایش یافت. اما تخمک های بدون سلول های کومولوس در غلظت های بالاتر ملاتونین (10 و 100 میکرومولار)، میزان بلوغ بیشتری &nbsp;(به ترتیب %84/34 و 79/5% ) را در مقایسه با گروه کنترل (%69/33 ) نشان دادند (0/002=</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11pt;">p</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11pt;">). میزان لقاح در محیط تیمار شده با 1 میکرومولار ملاتونین بالاتر بود ( %93/75، 0/007=</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11pt;">p</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11pt;">). میزان کلیواژ و تشکیل بلاستوسیست در محیط تامین شده با 10 و 100 نانومولار ملاتونین بهبود یافت ( %92/37 و% 89/36 در مقابل %81/25 در گروه کنترل،0/002 =</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11pt;">p</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11pt;">). در این تجربه یک پاسخ وابسته به غلظت تیمار ملاتونین را مشاهده نمودیم.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11pt;">نتیجه&shy;گیری: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">ملاتونین اگزوژن می تواند گسترش سلول های کومولوس، بلوغ آزمایشگاهی، وتکوین جنین را بهبود بخشد. با این وجود، یک پاسخ وابسته به غلظت در مراحل مختلف بلوغ و تکوین مشاهده شد. این ممکن است میزان حساسیت تخمک ها و جنین ها نسبت به شرایط کشت را منعکس کند.</span></span><u><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:11.0pt;"></span></span></u> <strong>Background:</strong> It is important to protect oocytes and embryos from oxidative stress in the culture medium. Melatonin has been shown to be a direct free radical scavenger.<br> <strong>Objective:</strong> Effect of melatonin during in vitro oocyte maturation, fertilization and embryo development of mouse oocytes was evaluated.<br> <strong>Materials and Methods:</strong> Oocytes from supper-ovulated mouse were divided to two groups: cumulus oocyte complexes (COCs, group I) and denuded COC (d-COCs, group II). The oocytes were cultured in maturation medium with different doses of melatonin (1&times;101-105 nM). The cumulus expansion and nuclear status were evaluated after 24 h of in-vitro maturation. The oocytes were used for in-vitro fertilization. The fertilized oocytes were cultured in medium supplemented with different doses of melatonin.<br> <strong>Results:</strong> The expansion (86.79%) and maturation (80.55%) rate of COCs increased in supplemented medium with 10 nM of melatonin vs. control group (73.33%), p=0.006 and p=0.026 respectively), but oocytes without cumulus cells indicated higher maturation rate at higher melatonin doses (10 and 100 M, 84.34% and 79.5% respectively( vs. 69.33% in control group (p=0.002). Fertilization rate was higher in treated medium with 1 &mu;M of melatonin (93.75%, p=0.007). The rate of cleavage and blastocyst formation was promoted in medium supplemented with 10 and 100 nM of melatonin (92.37% and 89.36% vs. 81.25% in control group, p=0.002). We observed a dose dependent response to melatonin treatment in this experiment.<br> <strong>Conclusion:</strong> Exogenous melatonin can promote cumulus cell expansion, in vitro oocyte maturation, and embryo development. However we investigated a dose-dependent response in different stages of maturation and development. It may reflect sensitive rate of oocytes and embryos to culture conditions. بلوغ آزمایشگاهی تخمک, تکوین, لقاح آزمایشگاهی, ملاتونین, مجموعه تخمک, کومولوس. In vitro oocyte maturation, Development, In vitro fertilization, Melatonin, Cumulus-oocyte complex. 11 18 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-1-430&slc_lang=en&sid=1 Mohammad Hadi Bahadori محمدهادی بهادری No Cellular and Molecular Research Center, Faculty of Medicine, Guilan University of Medical Sciences, Rasht, Iran مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گیلان، رشت، ایران Fatemeh Ghasemian فاطمه قاسمیان No Department of Biology, Biology Faculty, Kharazmi (Tarbiat Moallem) University, Tehran, Iran گروه بیولوژی، دانشکده بیولوژی، دانشگاه خوارزمی (تربیت معلم)، تهران، ایران Mina Ramezani مینا رمضانی No Department of Biology, Faculty of Sciences, Ashtian Branch, Islamic Azad University, Ashtian, Iran گروه بیولوژی، دانشکده علوم پایه، واحد آشتیان، آشتیان، ایران Zakieh Asgari زکیه عسگری Asgari_bio@yahoo.com Yes Department of Anatomy, Faculty of Medicine, Guilan University of Medical Sciences, Rasht, Iran گروه آناتومی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گیلان، رشت، ایران