International Journal of Reproductive BioMedicine

en بیان کمی ژن های توسعه یافته (Pou5f1 (Oct4 و (Mest (Peg1در انجماد شیشه ای جنین موش Quantitative expression of developmental genes, Pou5f1 (Oct4) and Mest (Peg1), in vitrified mouse embryos Original Article Original Article مقدمه: انجماد جنین فرآیندی است که در آن آب سلولها توسط مواد ضدیخ گرفته شده و جنین در دماهای زیر صفر نگهداری میشود. این فرایند ممکن است بر بقا و پتانسیل تکوین جنین تأثیرگذار باشد. هدف: در این مطالعه تأثیر انجماد جنینهای موش به روش شیشهای و با استفاده از کرایوتاپ بر میزان بیان ژنهای تکوینی Oct4 و Mest در مرحله بلاستوسیست بررسی شده است. مواد و روشها: بیان کمی دو ژن تکوینی Oct4 و Mest در دو گروه جنین موشهای پیش از لانه گزینی در دو گروه غیر انجمادی و منجمد شده با استفاده از جداسازی RNA و تکنیک Real-time RT-PCR اندازهگیری شد. نتایج: آنالیزهای PCR کم نشان داد که میزان بیان هر دو ژن Oct4 و Mest در گروه منجمد-ذوب شده نسبت به گروه غیر انجمادی کمتر است. نتیجهگیری: این مطالعه نشان داد که در جنینهای منجمد شدهای که از نظر ظاهری نرمال محسوب میشوند، میزان نسخههای دو ژن Oct4 و Mest کاهش دارد که نشاندهنده تأثیر منفی روش انجماد شیشهای بر سطوح بیان این دو ژن تکوینی است. Background: Embryo cryopreservation is the process that water is removed from the cell by cryoprotectant materials, and embryos are stored at temperature below zero. This process may affect the viability and developmental potential of embryos. Objective: In this study, the effect of the vitrification cryotop method on the expression level of Oct4 and Mest developmental genes in mouse blastocysts was examined. Materials and Methods: The collected 2-cell embryos of superovulated mouse by oviduct flushing were divided into non-vitrified and vitrified groups. These embryos were cultured to the blastocyst stage directly in the non-vitrified group and in the vitrified group, these embryos were cultured to 4-8 cell embryos, vitrified with cryotop in these stages and after 2-6 months, warmed and cultured to blastocyst embryos. Quantitative expression of two developmental genes, namely Oct4 and Mest, were performed in these groups, using RNA purification and Real-time RT-PCR. Results: Quantitative PCR analysis showed that the expression level of both genes, Oct4 and Mest, was reduced significantly in the vitrified-warmed group relative to the control group (p=0.046 and p=0.001). Conclusion: This study revealed that morphologically normal embryos show a reduced amount of Oct4 and Mest transcripts which indicate that the vitrification method negatively effects the expression level of these two developmental genes. موش, بلاستوسیت, انجماد شیشه ای, Oct4, Mest. Mice, Blastocyst, Vitrification, Oct4, Mest 733 0 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-1-528&slc_lang=en&sid=1 Masoumeh Rajabpour-Niknam معصومه رجب پور نیکنام No Department of Embryology, Reproductive Biomedicine Research Center, Royan Institute for Reproductive Biomedicine, ACECR, Tehran, Iran گروه جنین شناسی، مرکز تحقیقات پزشکی تولید مثل، پژوهشکده زیست شناسی و علوم پزشکی تولید مثل جهاددانشگاهی، پژوهشگاه رویان، تهران، ایران Mehdi Totonchi مهدی توتونچی No Department of Genetics, Reproductive Biomedicine Research Center, Royan Institute for Reproductive Biomedicine, ACECR, Tehran, Iran گروه ژنتیک، مرکز تحقیقات پزشکی تولید مثل، پژوهشکده زیست شناسی و علوم پزشکی تولید مثل جهاددانشگاهی، پژوهشگاه رویان، تهران، ایران Maryam Shahhosseini مریم شاه حسینی No Department of Genetics, Reproductive Biomedicine Research Center, Royan Institute for Reproductive Biomedicine, ACECR, Tehran, Iran گروه ژنتیک، مرکز تحقیقات پزشکی تولید مثل، پژوهشکده زیست شناسی و علوم پزشکی تولید مثل جهاددانشگاهی، پژوهشگاه رویان، تهران، ایران Ali Farrokhi علی فرخی No Department of Stem Cells and Developmental Biology, Cell Science Research Center, Royan Institute for Stem Cell Biology and Technology, ACECR, Tehran, Iran گروه سلول های بنیادی و زیست شناسی تکوین، مرکز تحقیقات علوم سلولی، پژوهشکده زیست شناسی و علوم پزشکی تولید مثل جهاددانشگاهی، پژوهشگاه رویان، تهران، ایران Hiva Alipour هیوا علی پور No Department of Embryology, Reproductive Biomedicine Research Center, Royan Institute for Reproductive Biomedicine, ACECR, Tehran, Iran گروه جنین شناسی، مرکز تحقیقات پزشکی تولید مثل، پژوهشکده زیست شناسی و علوم پزشکی تولید مثل جهاددانشگاهی، پژوهشگاه رویان، تهران، ایران Poopak Eftekhari-Yazdi پوپک افتخاری یزدی peyazdi@yahoo.com Yes Department of Embryology, Reproductive Biomedicine Research Center, Royan Institute for Reproductive Biomedicine, ACECR, Tehran, Iran گروه جنین شناسی، مرکز تحقیقات پزشکی تولید مثل، پژوهشکده زیست شناسی و علوم پزشکی تولید مثل جهاددانشگاهی، پژوهشگاه رویان، تهران، ایران