en جداسازی، تکثیرو غنی سازی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی موش نوزاد در روش هم کشتی با سلول های سرتولی با منبع یکسان Original Article Original Article <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مقدمه: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">سلول&shy;های بنیادی اسپرماتوگونی (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">SSCs</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">) یک جمعیت خودنوزا از سلول&shy;های بنیادی جنس مذکر هستند. </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">SSC</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> ها همانند سلول&shy;های بنیادی جنینی دارای پتانسیل تمایزی هستند. این سلول&shy;های بنیادی شبه&shy;جنینی می&shy;توانند منبع بالقوه&shy;ای برای سلول&shy;های پرتوان جهت درمان بر پایه سلول بنیادی باشند.</span></span><span style="font-family:b nazanin;"></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">هدف:</span></span></strong> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">ارائه یک سیستم هم کشتی ساده و مقرون به صرفه برای تولید سلول&shy;های بنیادی شبه جنینی از بیضه موش نوزاد.</span></span><span style="font-size:16.0pt;"></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مواد و روش&shy;ها:</span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> سلول&shy;های جدا شده از بیضه در محیط </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">DMEM/F12</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> کشت داده شدند. ماهیت سلول&shy;های جداسازی شده و سلول&shy;های بنیادی شبه جنینی به دست آمده با روش ایمنوسیتوشیمی و از طریق ارزیابی وجود پروتئین&shy;های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">PLZF</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">، </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Vimentin</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">، </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Oct4</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Nanog</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> تأیید شد و بیان ژن&shy;های اختصاصی سلول ژرم و پرتوانی با استفاده از تکنیک </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">qPCR</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">، به ترتیب در کلونی&shy;های بنیادی شبه جنینی و</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">SSC</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">ها مورد ارزیابی قرار گرفت.</span></span> <span dir="LTR"></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتایج:</span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> نتایج حاصل از </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;">qPCR</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> نشان داد که بیان ژن&shy;های پرتوانی در سلول&shy;های بنیادی شبه جنینی افزایش و بیان ژن&shy;های اختصاصی سلول ژرم کاهش معنی&shy;دار پیدا می&shy;کنند به&shy;علاوه شاخص&shy;های پرتوانی درسلول&shy;های بنیادی شبه جنینی مثبت بودند. یافته&shy;های این مطالعه نشان داد که با این روش تولید سلول&shy;های بنیادی شبه جنینی از </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">SSC</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> ها، ساده تر از روش&shy;های شناخته شده است.</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;"></span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتیجه&shy;گیری:</span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> ما یک راه ساده و عملی را برای برای به دست آوردن سلول&shy;های بنیادی شبه جنینی از </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">SSC</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> ها در محیط کشت معرفی کرده ایم. در واقع یک سیستم کشت کارآمد می&shy;تواند یک روش با ارزش برای مطالعه سیستم&shy;های خود تجدید در </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">SSC</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> ها و تولید سلول&shy;های شبه بنیادی باشد.</span></span><br> &nbsp; <strong>Background:</strong> Spermatogonial stem cell (SSC) is a self-renewing population of male adult stem cell. SSCs have a differentiation potential which are similar to embryonic stem cells. These Embryonic stem like (ES-like) cells can be a potential source for pluripotent cells for stem cell-based therapy.<br> <strong>Objective:</strong> This study presents an economical and simple co-culture system for pluripotent stem cells generation from neonatal mouse testis<br> <strong>Materials and Methods:</strong> Isolated testicular cells were cultured in DMEM/F12. Characteristics of the isolated cells and obtained ES-like cell were immune-cytochemically confirmed by examining the presence of PLZF, vimentin, Oct4 and Nanog protein. Expression of the pluripotency and germ-cell specific genes was analyzed by qPCR in derived ES-like colony and SSCs respectively.<br> <strong>Results: </strong>The experiment results indicated that our method of obtaining pluripotent ES-like cells from spermatogonial cells (SCs) is simpler than the described methods. ES-like cells were immunopositive for pluripotency markers. ES-like cell qPCR results indicated significant increase in pluripotency genes expression and significant decrease in germ cell-specific genes expression.<br> <strong>Conclusion:</strong> The results indicated that ES-like cell with pluripotency characteristic were generated from freshly isolated spermatogonial cells. The pluripotent stem cells provide a cellular reservoir usable for regenerative medicine instead of embryonic stem cells.&nbsp; سلول های بنیادی اسپرماتوگونی, سلول بنیادی شبه جنینی, پرتوانی, هم کشتی. Spermatogonial stem cells, Embryonic stem like cell, Pluripotent stem cells, Co-culture. 37 46 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-1-312&slc_lang=en&sid=1 Mohammad Hossein Asadi محمد حسین اسدی No Department of Anatomical Sciences, Faculty of Medical Sciences, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه علوم تشریح، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله، تهران، ایران Setareh Javanmardi ستاره جوانمردی setareh_javanmardy@yahoo.com Yes Department of Anatomical Sciences, Faculty of Medical Sciences, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه علوم تشریح، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله، تهران، ایران Mansoureh Movahedin منصوره موحدین No Department of Anatomical Sciences, Medical Sciences Faculty, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran گروه علوم تشریح، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران