en Cryopreservation Slow به انجماد شیشه ای در اسپرماتوزوای انسانی برتری ندارد: یک مطالعه کنترل شده تجربی Original Article Original Article <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مقدمه: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">کریوپرزرواسیون</span></span> <span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">(Cryopreservation) </span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">اسپرماتوزوا جهت مدیریت ناباروری و یا در موارد دیگر پزشکی کاربرد دارد. کریوپرزرواسیون روتین بستگی دارد</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">به نفوذ کرایوپرتکتانت به طوری</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">که اثرات سمی آن توجه را به طرف روشهای انجماد شیشه ای (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Vitrification</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">)</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">که از کرایوپرتکتانت عادی می باشد جلب کرده است.</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;"></span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">هدف: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مقایسه بین کریوپرزرواسیون آهسته و </span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">انجماد شیشه ای</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> در اسپرماتوزوای انسانی.</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:13.0pt;"></span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مواد و روش ها: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">این مطالعه کنترل شده تجربی بر روی 33 نمونه مایع منی انجام گرفت. هر نمونه به سه قسمت مساوی تقسیم شد کنترل تازه، فریز آهسته سنتی و انجماد شیشه ای بدون کریوپروتکتانت. زنده مانی (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Viability</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">) </span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">و توانایی غشاء میتوکندریال (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">MMP</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">) اسپرماتوزوای کنترل و بعد از ذوب بوسیله کیت زنده مانی اسپرم و کیت </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;">Jc-1</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> به ترتیب اندازه گیری و به وسیله </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">fluorescence-activated cell sorting</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">آنالیز گردید.</span></span><span dir="LTR"></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتایج: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">کاهش معنی دار حرکت پیشرونده، زنده مانی و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">MMP</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">در فریز و ذوب شدن مشاهده شد، در حالیکه هیچ تفاوت معنی داری بین دو روش کریوپرزرواسیون مشاهده نگردید. کریوپرزرواسیون منجر به 48% کاهش در درصد اسپرماتوزواهای زنده و 54/5% افزایش در درصد اسپرماتوزاهای مرده شد. </span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">علاوه بر این</span></span> <span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">MMP</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> بالا 24% کاهش و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">MMP</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> پایین دچار 34/75% افزایش در نتیجه فریز و ذوب گردید. حرکت پیشرونده اسپرماتوزوا به طور معنی داری در ارتباط مثبت با </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">MMP</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> بالا و در ارتباط منفی با </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">MMP</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> پایین در نمونه های کنترل و همچنین نمونه های بعد از ذوب بود. </span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:13.0pt;"></span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتیجه گیری: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">هر چند که هر دو روش کریوپرزرواسیون نتایج مشابه را نشان دادند ولی انجماد شیشه ای ارزانتر، سریعتر، آسانتر و همراه با سمیت کمتری است بنابراین انجماد شیشه ای جهت کاربرد کلینیکی ارجح است.</span></span> <strong>Background:</strong> Spermatozoa cryopreservation is used for the management of infertility and some other medical conditions. The routinely applied cryopreservation technique depends on permeating cryoprotectants, whose toxic effects have raised the attention towards permeating cryoprotectants-free vitrification technique.<br> <strong>Objective:</strong> To compare between the application of slow cryopreservation and vitrification on human spermatozoa.<br> <strong>Materials and Methods:</strong> This was an experimental controlled study involving 33 human semen samples, where each sample was divided into three equal parts; fresh control, conventional slow freezing, and permeating cryoprotectants-free vitrification. Viability and mitochondrial membrane potential (MMP) of control and post-thawing spermatozoa were assessed with the sperm viability kit and the JC-1 kit, respectively, using fluorescence-activated cell sorting analysis.<br> <strong>Results: </strong>Significant reduction of the progressive motility, viability and MMP was observed by the procedure of freezing and thawing, while there was not any significant difference between both cryopreservation techniques. Cryopreservation resulted in 48% reduction of the percentage of viable spermatozoa and 54.5% rise in the percentage of dead spermatozoa. In addition, high MMP was reduced by 24% and low MMP was increased by 34.75% in response to freezing and thawing. Progressive motility of spermatozoa was correlated significantly positive with high MMP and significantly negative with low MMP in control as well as post-thawing specimens (r=0.8881/ -0.8412, 0.7461/ -0.7510 and 0.7603/ -0.7839 for control, slow and vitrification respectively, p=0.0001). &nbsp;<br> <strong>Conclusion:</strong> Although both cryopreservation techniques have similar results, vitrification is faster, easier and associated with less toxicity and costs. Thus, vitrification is recommended for the clinical application.  اسپرماتوزوای انسانی, انجماد شیشه ای, زنده مانی اسپرم, توانایی غشاء میتوکندریال. Human spermatozoa,Cryopreservation,Vitrification, Sperm viability,Mitochondrial membrane potential 633 644 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-1-195&slc_lang=en&sid=1 Mohamed Sheata Ali Mohamed Mohammed.shehatta1@gmail.com Yes Women Hospital, Faculty of Medicine, University of Cologne. Kerpener Straße 62, 50937 Cologne, Germany