en تعامل بین سلول های سرتولی و فاکتور مهار کننده لوسمی در تکثیر و تمایز سلول های بنیادی اسپرماتوگونی در محیط آزمایشگاه Original Article Original Article <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مقدمه: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">سلول های سرتولی نقش محوری در ایجاد محیط مناسب جهت خودنوزایی و </span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">متعهد شدن</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> سلول های بنیادی اسپرماتوگونی جهت تمایز ایفا می کنند. بقای سلول های بنیادی اسپرماتوگونی و یا القای اسپرماتوژنز در محیط آزمایشگاه ممکن است یک روش درمانی جهت درمان ناباروری افراد مذکر محسوب شود.</span></span><span dir="LTR"></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">هدف:</span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> این مطالعه نقش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;">LIF</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> را در تکثیر سلول های بنیادی اسپرماتوگونی و عملکرد سلول های سرتولی را در تکثیر و تمایز این سلول ها مورد ارزیابی قرار داده است.</span></span><em><span style="font-style:normal;"></span></em><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مواد و روش ها: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">سلول های بنیادی اسپرماتوگونی از بیضه موش های نر بالغ با تکنیک جداسازی با میدان مغناطیسی و آنتی بادی برعلیه آنتی ژن 1 سلول های تیموسی جدا گردید. از طرف دیگر سلول های سرتولی هم با استفاده از پلیت های پوشیده شده با لکتین جداسازی شدند. سلول های بنیادی اسپرماتوگونی در حضور و عدم حضور </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;">LIF</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> بر روی سلول سرتولی به مدت 7 روز کشت داده شدند. تاثیر این شرایط بر روی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی از نظر بیان ژنهای میوزی و پس میوزی با روش واکنش زنجیره ای پلیمراز معکوس و همچنین از نظر ساختار میکروسکوپی مورد ارزیابی قرار گرفت.</span></span><em><span dir="LTR"></span></em><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتایج: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتایج نشان داد که سلول هایی که با سلول سرتولی در حضور </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;">LIF</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> هم کشتی یافته بودند کلونی هایی را بر روی لایه سلولهای سرتولی تشکیل دادند. این کلونی ها فعالیت آلکالین فسفاتازی داشته و ژن های اختصاصی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی را بیان می کردند. سلول های بنیادی اسپرماتوگونی در غیاب </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;">LIF</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> تمایل زیادی جهت تکثیر از خود نشان ندادند</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> و ژنهای میوزی و پس میوزی را بیان کردند و همچنین این سلول ها ژن های اختصاصی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی را بیان نکردند (05/0&ge;</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;">p</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">).</span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتیجه</span></span></strong> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">گیری: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">یافته های ما نشان داد که هم کشتی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی به همراه سلول سرتولی شرایطی را جهت تکثیر و تمایز کارآمد جهت درمان ناباروری مردان فراهم می کند.</span></span><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:14.0pt;"></span></span></strong> Background: Sertoli cells play a pivotal role in creating microenvironments essential for spermatogonial stem cells (SSCs) self-renewal and commitment to differentiation. Maintenance of SSCs and or induction of in vitro spermiogenesis may provide a therapeutic strategy to treat male infertility. Objective: This study investigated the role of luekemia inhibitory factor (LIF) on the propagation of SSCs and both functions of Sertoli cells on the proliferation and differentiation of these cells. Materials and Methods: SSCs were sorted from the testes of adult male mice by magnetic activated cell sorting and thymus cell antigen 1 antibody. On the other hand, isolated Sertoli cells were enriched using lectin coated plates. SSCs were cultured on Sertoli cells for 7 days in the absence or presence of LIF. The effects of these conditions were evaluated by microscopy and expression of meiotic and post meiotic transcripts by reverse transcriptase polymerase chain reaction. Results: Our data showed that SSCs co-cultured with Sertoli cells in the presence of LIF formed colonies on top of the Sertoli cells. These colonies had alkaline phosphatesase activity and expressed SSCs specific genes. SSCs were enjoyed limited development after the mere removal of LIF, and exhibiting expression of meiotic and postmeiotic transcript and loss of SSCs specific gene expression (p< 0.05). Conclusion: Our findings represent co-culture of SSCs with Sertoli cells provides conditions that may allow efficient proliferation and differentiation of SSCs for male infertility treatment. سلول های بنیادی اسپرماتوگونی, سلول سرتولی, تکثیر, تمایز, هم کشتی, فاکتور مهارکننده لوسمی. Spermatogonial stem cells,Sertoli cell,Proliferation,Differentiation,Co-culture,Luekemia inhibitory factor 679 686 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-100-618&slc_lang=en&sid=1 Tayebeh Rastegar طیبه رستگار No Department of Anatomy, School of Medicine, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه علوم تشریح، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران Mehryar Habibi Roudkenar مهریار حبیبی رودکنار No Blood Transfusion Research Center, High Institute for Research and Education in Transfusion Medicine, Tehran, Iran مرکز تحقیقات انتقال خون، موسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون، تهران، ایران Soraya Parvari ثریا پروری No Department of Anatomy, School of Medicine, Alborz University of Medical Sciences, Karaj, Iran گروه علوم تشریح، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی البرز، کرج، ایران Maryam Baazm مریم باعزم dr.baazm@arakmu.ac.ir Yes Department of Anatomy, School of Medicine, Arak University of Medical Sciences, Arak, Iran گروه علوم تشریح، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایران