en تغییر بیان ژن های آپوپتوزی و لانه گزینی جنین های موشی پس از انجماد مجدد Original Article Original Article <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مقدمه: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">امروزه انجماد شیشه ای جنین&shy;ها و تخمک&shy;ها یک تکنیک روتین می&shy;باشد و در برخی از مواقع انجماد شیشه ای مجدد جنین&shy;ها مورد نیاز می&shy;باشد. اما اطلاعات اندکی در مورد اثرات انجماد شیشه ای مجدد بر میزان بیان ژن&shy;ها وجود دارد.</span></span><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;"></span></span></strong><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">هدف: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">در این مطالعه اثر انجماد شیشه ای مجدد بر میزان بیان ژن های آپوپتوزی </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Bax</span></span></em><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">، </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Bcl-2</span></span></em> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">ولانه گزینی </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">ErbB4</span></span></em><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> در جین های مرحله کامپکشن بررسی گردید. </span></span><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;"></span></span></strong><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مواد و روش&shy;ها: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">جنین&shy;های هشت سلولی (240=</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">n</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">) از موش&shy;های ماده بالغ 62-60 ساعت پس از تزریق </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">HCG</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> جمع آوری گردید. جنین&shy;ها به طور تصادفی به سه گروه شامل: تازه، انجماد در مرحله هشت سلولی (80=</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">n</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">)، انجماد در مرحله هشت سلولی (80=</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">n</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">) و انجماد مجدد در مرحله کامپکشن (80=</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">n</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">) تقسیم شدند. جنین&shy;ها با استفاده از کرایولاک توصیف شده بوسیله </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Kuwayama</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> منجمد شدند. بیان ژن&shy;های </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Bcl-2</span></span></em><em><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">، </span></span></em><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Bax</span></span></em><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> و </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">ErbB4</span></span></em><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> در بلاستوسیست&shy;های جمع آوری شده با تکنیک </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Q-PCR</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> ارزیابی گردید.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتایج: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتایج مطالعه ما نشان داد که میزان تکوین به بلاستوسیست ثانویه بین گروه</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;">&shy;</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">های انجمادی و انجماد مجدد مشابه بود. گرچه جنین</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;">&shy;</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">های انجماد مجدد کاهش معنی</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;">&shy;</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">داری را نسبت به جنین</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;">&shy;</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">های تازه نشان دادند (03/0=</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">p</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">). جنین های انجماد مجدد تفاوت&shy;های معنی&shy;داری را در بیان ژن&shy;های</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">آپوپتوزی نسبت به&nbsp; جنین&shy;های تازه نشان دادند (004/0=</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">p</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">) گرچه بیان ژن&shy;های</span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Bax</span></span></em><em><span dir="LTR"><span style="font-size:11.0pt;">, </span></span></em><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Bcl-2</span></span></em> &nbsp;<span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">تفاوت معنی&shy;داری را بین گروه&shy;های انجماد مجدد و یک بار انجماد نشان نداد. بیان ژن </span></span>&nbsp;&nbsp;<em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">ErbB4</span></span></em><em><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">به</span></span></em><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> عنوان ژن لانه&shy;گزینی درجنین&shy;های انجماد مجدد نسبت جنین&shy;های تازه کاهش معنی&shy;داری را نشان داد (003/0=</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">p</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">)، گرچه بین جنین&shy;های انجماد مجدد و یک بار انجماد مشابه بود. </span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتیجه&shy; گیری: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">انجماد مجدد می&shy;تواند بیان ژن&shy;های </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Bax</span></span></em><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">، </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Bcl-2</span></span></em><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> و </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">ErbB4</span></span></em><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> و میزان تکوین جنین&shy;های موش را در مرحله کامپکشن تغییر دهد.</span></span> <strong>Background:</strong> Nowadays, oocytes and embryos vitrification has become a routine technique. Based on clinical judgment, re-vitrification maybe required. But little is known about re-vitrification impact on genes expression.<br> <strong>Objective: </strong>The impact of re-vitrification on apoptotic and implanting genes, Bax, Bcl-2 and ErbB4, at compaction stage embryos were evaluated in this study.<br> <strong>Materials and Methods: </strong>In this experimental study, 8 cell embryos (n=240) were collected from female mature mice, 60-62 hr post HCG injection. The embryos were divided randomly to 3 groups included: fresh (n=80), vitrified at 8 cell stage (n=80), vitrified at 8 cell stage thawed and re-vitrified at compaction stage (n=80). Embryos were vitrified by using cryolock, (open system) described by Kuwayama. Q-PCR was used to examine the expression of Bax, Bcl2 ErbB4 genes in derived blastocysts.<br> <strong>Results: </strong>Our result showed that expanded blastocyst rate was similar between vitrified and re-vitrified groups, while re-vitrified embryos showed significant decrease in expanded blastocyst rate comparing with fresh embryos (p=0.03). In addition, significant difference was observed on apoptotic gene expression when comparing re-vitrified and fresh embryos (p=0.004), however expression of Bax and Bcl-2 (apoptotic) genes didn&#39;t demonstrate a significant difference between re-vitrified and vitrified groups. The expression rate of ErbB4, an implantation gene was decreased in re-vitrified embryos comparing with fresh embryos (p=0.003), but it was similar between re-vitrified and vitrified embryos.<br> <strong>Conclusion:</strong> Re-vitrification can alter the expression of Bax, Bcl-2 and ErbB4 genes and developmental rate of mouse embryos in compaction stage. انجماد شیشه ای, جنین , آپوپتوز, ژن, انجماد شیشه ای مجدد. Vitrification,Embryo,Apoptosis,Gene 511 518 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-1-125&slc_lang=en&sid=1 Nasrin Majidi Gharenaz نسرین مجیدی قره ناز No Department of Anatomical Sciences, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran ﮔﺮوه ﻋﻠﻮم ﺗﺸﺮﻳحی، داﻧﺸﻜﺪه ﻋﻠﻮم ﭘﺰﺷﻜﻲ، داﻧﺸﮕﺎه ﺗﺮﺑﻴﺖ ﻣﺪرس، ﺗﻬﺮان، اﻳﺮان Mansoureh Movahedin منصوره موحدین mansoure@modares.ac.ir Yes Department of Anatomical Sciences, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran ﮔﺮوه ﻋﻠﻮم ﺗﺸﺮﻳحی، داﻧﺸﻜﺪه ﻋﻠﻮم ﭘﺰﺷﻜﻲ، داﻧﺸﮕﺎه ﺗﺮﺑﻴﺖ ﻣﺪرس، ﺗﻬﺮان، اﻳﺮان Zohreh Mazaheri زهره مظاهری No Department of Anatomical Sciences, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran ﮔﺮوه ﻋﻠﻮم ﺗﺸﺮﻳحی، داﻧﺸﻜﺪه ﻋﻠﻮم ﭘﺰﺷﻜﻲ، داﻧﺸﮕﺎه ﺗﺮﺑﻴﺖ ﻣﺪرس، ﺗﻬﺮان، اﻳﺮان Shahram Pour beiranvand شهرام پور بیرانوند No Department of Anatomical Sciences, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran ﮔﺮوه ﻋﻠﻮم ﺗﺸﺮﻳحی، داﻧﺸﻜﺪه ﻋﻠﻮم ﭘﺰﺷﻜﻲ، داﻧﺸﮕﺎه ﺗﺮﺑﻴﺖ ﻣﺪرس، ﺗﻬﺮان، اﻳﺮان