en اثر مریم گلی بر روی سلول های گرانولوزا و اووسیت های کشت داده شده موش: یک مطالعه کاربردی Original Article Original Article <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مقدمه: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مریم گلی (</span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Salvia officinalis L</span></span></em><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">) جهت درمان از زمان&shy;های گذشته استفاده می&shy;شده است اما درباره اثرات این گیاه بر روی دستگاه تناسلی سالم اطلاعات کمی وجود دارد. بررسی اثرات سمی مریم گلی بر روی سلول</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;">&shy;</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">های گرانولوزا و بلوغ اووسیت</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;">&shy;</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">ها مورد بررسی قرار گرفت.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">هدف: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">در تحقیق حاضر اثرات این گیاه بر روی سلول<strong>&shy;</strong>های گرانولوزا و اووسیت<strong>&shy;</strong>های طبیعی بررسی می<strong>&shy;</strong>شود.</span></span><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;"></span></span></span></strong><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">موارد و روش&shy;ها: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">سلول<strong>&shy;</strong>های گرانولوزا و اووسیت<strong>&shy;</strong>ها از تخمدان<strong>&shy;</strong>های تحریک شده برای تخمک<strong>&shy;</strong>گذاری موش<strong>&shy;</strong>های نابالغ استخراج شدند. 24 ساعت بعد سلول<strong>&shy;</strong>ها با دوز<strong>&shy;</strong>های 0، 10، 50 ،100، 500 و 1000 میکرو<strong>&shy;</strong>گرم در هر میلی<strong>&shy;</strong>لیتر عصاره هیدروالکلی مریم گلی تیمار شدند. زیستایی، تراکم کروماتین، سطح استردیول و پروژسترون، میزان لیپید، اپوپتوز و فعالیت الکالین فسفاتاز سلول<strong>&shy;</strong>های گرانولوزا اندازه<strong>&shy;</strong>گیری شد. مراحل مختلف بلوغ تخمک<strong>&shy;</strong>ها شامل ژرمینال وزیکول (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">GV</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">)، گسستگی ژرمینال وزیکول (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">GVBD</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">) و متافاز </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;">&nbsp;(</span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">MII</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;">)</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">بررسی شد.</span></span><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;"></span></span></span></strong><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتایج: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتایج بیانگر سمیت دوزهای</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">&mu;g/ml </span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">&nbsp;500 و 1000 عصاره بود. اکثر سلول<strong>&shy;</strong>های گرانولوزا در دوز </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">&mu;g/ml</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> 100</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">در مراحل اولیه اپوپتوز بودند اما در دوز </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">&mu;g/ml</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> 500</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">مرگ سلولی مشاهده شد. سطح پروژسترون در دوز</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">&mu;g/ml </span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">&nbsp;100 و بالاتر از آن کاهش یافت ولی سطح استردیول و فعالیت الکالین فسفاتاز در این دوزها افزایش نشان داد. قطرات لیپیدی موجود درسلول<strong>&shy;</strong>های گرانولوزا در کلیه دوزها بخصوص </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">&mu;g/ml</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;"> 500 و 1000 از کاهش چشمگیری برخوردار بود. هسته و سیتوپلاسم اووسیت<strong>&shy;</strong>ها در تمامی دوزها به سمت متراکم شدن پیش رفت و از شدت میوز آن<strong>&shy;</strong>ها کاسته شد.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">نتیجه&shy; گیری: </span></span></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:11.0pt;">دوزهای بالای عصاره هیدروالکلی مریم گلی زیستایی، تکثیر، ترشح سلول<strong>&shy;</strong>های گرانولوزا و رسیدگی اووسیت<strong>&shy;</strong>ها را مهار می&shy;کند.</span></span><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:arial,sans-serif;"><span style="font-size:11.0pt;"></span></span></span></strong><br> &nbsp; <strong>Background: </strong>Salvia officinalis L. has been used since ancient times but there are little data about effects of this herb on normal reproductive cells.<br> <strong>Objective:</strong> To investigate the toxicity effects of Salvia officinalis L. on granulosa cells (GCs) and maturation of oocytes.<br> <strong>Materials and Methods:</strong> GCs and oocytes were extracted from superovulated ovaries of immature mice. The cells were treated with concentrations of 10, 50, 100, 500, and 1000 &mu;g/ml of Salvia officinalis hydroalcoholic extracts and compared with the control culture. Bioviability, chromatin condensation, estradiol and progesterone concentrations, lipid synthesis, apoptosis, and alkaline phosphatase activity of GCs were measured. In vitro maturation of oocytes by determination of different maturation stages of oocytes including germinal vesicle, germinal vesicle breaks down, and metaphase II were examined.<br> <strong>Results:</strong> The results revealed that 500 and 1000 &mu;g/ml concentrations of Salvia officinalis L. were toxic. The most of the GCs were in the early stages of apoptosis in 100 &mu;g/ml treated culture and cell death happened with 500 &mu;g/ml treatment. Progesterone concentration was reduced in 100 &mu;g/ml and higher doses but estradiol concentration and alkaline phosphatase showed opposite effects. The lipid droplets content of GCs reduced significantly in all groups especially in 500 and 1000 &mu;g/ml. Finally, oocyte&rsquo;s nucleus and cytoplasm showed a high level of condensation, and meiosis rate reduced in all treated cultures.<br> <strong>Conclusion:</strong> Our findings suggested that higher dose of Salvia officinalis hydroalcoholic extracts inhibits, oocyte maturation, GCs bioviability, proliferation, and secretion. سلول گرانولوزا, بلوغ ازمایشگاهی تخمک, اووسیت, تخمدان, مریم گلی. Granulosa cell, In vitro maturation, Oocytes, Ovary, Salvia officinalis 649 660 http://ijrm.ir/browse.php?a_code=A-10-1-288&slc_lang=en&sid=1 Malihezaman Monsefi ملیحه الزمان منصفی monsefi@susc.ac.ir Yes Department of Biology, School of Sciences, Shiraz University, Shiraz, Iran. بخش زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه شیراز، شیراز، ایران Akram Nadi اکرم نادی monsefi@susc.ac.ir No Department of Biology, School of Sciences, Shiraz University, Shiraz, Iran بخش زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه شیراز، شیراز، ایران Zeinab Alinejad زینب علی نژاد monsefi@susc.ac.ir No Department of Biology, School of Sciences, Shiraz University, Shiraz, Iran بخش زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه شیراز، شیراز، ایران