یکشنبه 2 دی 1403
[Archive]
دوره 11، شماره 7 - ( 7-1392 )
جلد 11 شماره 7 صفحات 0-551 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Akhondi M M, Mohazzab A, Jeddi-Tehrani M, Sadeghi M R, Eidi A, Khodadadi A et al . Propagation of human germ stem cells in long-term culture. IJRM 2013; 11 (7) :551-0
URL: http://ijrm.ir/article-1-444-fa.html
URL: http://ijrm.ir/article-1-444-fa.html
آخوندی محمد مهدی، مهذب آرش، جدی تهرانی محمود، صادقی محمدرضا، عیدی اکرم، خدادادی عباس و همکاران.. تکثیر سلولهای بنیادی زاینده انسانی در کشت دراز مدت. International Journal of Reproductive BioMedicine. 1392; 11 (7) :551-0
محمد مهدی آخوندی1 
، آرش مهذب1 ، محمود جدی تهرانی2 ، محمدرضا صادقی2 ، اکرم عیدی3 ، عباس خدادادی4 ، زینب پیراور* 5
، آرش مهذب1 ، محمود جدی تهرانی2 ، محمدرضا صادقی2 ، اکرم عیدی3 ، عباس خدادادی4 ، زینب پیراور* 5
1- پژوهشکده بیوتکنولوژی تولیدمثل، پژوهشگاه فناوری های نوین علوم زیستی جهاد دانشگاهی ابن سینا، تهران، ایران
2- پژوهشکده آنتی بادی مونوکلونال، پژوهشگاه فناوری های نوین علوم زیستی جهاد دانشگاهی ابن سینا، تهران، ایران
3- دانشکده علوم پایه دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات، تهران، ایران
4- مرکز تحقیقات بانک بافت ایران، دانشکده علوم پژشکی تهران، تهران، ایران
5- دانشکده علوم پایه دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات، تهران، ایران ،saba.piravar@gmail.com
2- پژوهشکده آنتی بادی مونوکلونال، پژوهشگاه فناوری های نوین علوم زیستی جهاد دانشگاهی ابن سینا، تهران، ایران
3- دانشکده علوم پایه دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات، تهران، ایران
4- مرکز تحقیقات بانک بافت ایران، دانشکده علوم پژشکی تهران، تهران، ایران
5- دانشکده علوم پایه دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات، تهران، ایران ،
چکیده: (3818 مشاهده)
مقدمه: سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی بخشی از جمعیت سلولهای اسپرماتوگونی تمایز نیافته نوع A هستند که آغاز کننده پروسه پیچیده اسپرماتوژنز میباشند. مطالعات مختلفی در زمینه کشت این سلولها در محیط in vitro تاکنون انجام نشده است. اما مطالعات موجود در مورد اسپرماتوگونیهای انسانی محدود میباشد. هدف از کشت این سلولها و ازدیاد آنها در محیط کشت، پیوند این سلولها جهت درمان ناباروری در بیماران مبتلا به سرطان پس پایان پروسه درمان است.
هدف: در این مطالعه، کشت سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی انسانی در محیط کشت به مدت شش هفته و شناسایی سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی در محیط کشت با استفاده ار مارکرهای اختصاصی این سلولها شامل Oct4 و PLZF انجام شد.
مواد و روشها: بافت بیضه انسانی گرفته شده از بیمار مرگ مغزی، با استفاده از هضم آنزیمی بوسیله کلاژناز تیپ 4 و تریپسین هضم گردید. سلولهای جدا شده با استفاده از محیط کشت StemPro34 غنی شده با مواد لازم جهت کشت سلولهای اسپرماتوگونی و فاکتورهای رشد از جمله GDNF، bFGF، EGF و LIF جهت کمک به تقسیمات خودنوزایی سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی کشت داده شدند. مطالعات ایمونوهیستوشیمی برای تشخیص مارکر Oct4 در بافت بیضه و سلولهای اسپرماتوگونی در طول کشت انجام گردید. همینطور از واکنشهای زنجیرهای پلیمراز معکوس برای ژن PLZF جهت اثبات سلولهای اسپرماتوگونی در بافت و در طول کشت استفاده شد.
نتایج: سلولهای بنیادی زاینده بافت بیضه انسانی، پس از کشت و تکثیر به مدت 6 هفته در محیط کشت همراه با فاکتورهای رشد اختصاصی، توسط مارکرهای اختصاصی این سلولهای بنیادی شامل Oct4 و PLZF شناسایی شدند.
نتیجهگیری: سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی انسانی قادرند در محیط کشت با استفاده از فاکتورهای تغذیهای مخصوص رشد این سلولها بدون تمایز رشد کرده و با تقسیمات خود نوزایی زیاد شوند. این سلولها مارکرهای اختصاصی خود را در طول کشت دراز مدت مطابق با بافت بیضه بیان میکنند.
هدف: در این مطالعه، کشت سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی انسانی در محیط کشت به مدت شش هفته و شناسایی سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی در محیط کشت با استفاده ار مارکرهای اختصاصی این سلولها شامل Oct4 و PLZF انجام شد.
مواد و روشها: بافت بیضه انسانی گرفته شده از بیمار مرگ مغزی، با استفاده از هضم آنزیمی بوسیله کلاژناز تیپ 4 و تریپسین هضم گردید. سلولهای جدا شده با استفاده از محیط کشت StemPro34 غنی شده با مواد لازم جهت کشت سلولهای اسپرماتوگونی و فاکتورهای رشد از جمله GDNF، bFGF، EGF و LIF جهت کمک به تقسیمات خودنوزایی سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی کشت داده شدند. مطالعات ایمونوهیستوشیمی برای تشخیص مارکر Oct4 در بافت بیضه و سلولهای اسپرماتوگونی در طول کشت انجام گردید. همینطور از واکنشهای زنجیرهای پلیمراز معکوس برای ژن PLZF جهت اثبات سلولهای اسپرماتوگونی در بافت و در طول کشت استفاده شد.
نتایج: سلولهای بنیادی زاینده بافت بیضه انسانی، پس از کشت و تکثیر به مدت 6 هفته در محیط کشت همراه با فاکتورهای رشد اختصاصی، توسط مارکرهای اختصاصی این سلولهای بنیادی شامل Oct4 و PLZF شناسایی شدند.
نتیجهگیری: سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی انسانی قادرند در محیط کشت با استفاده از فاکتورهای تغذیهای مخصوص رشد این سلولها بدون تمایز رشد کرده و با تقسیمات خود نوزایی زیاد شوند. این سلولها مارکرهای اختصاصی خود را در طول کشت دراز مدت مطابق با بافت بیضه بیان میکنند.
نوع مطالعه: Original Article |
فهرست منابع
1. Clermont Y. Renewal of spermatogonia in man. Am J Anat 1966; 118: 509-524. [DOI:10.1002/aja.1001180211]
2. Wu X, Goodyear SM, Tobias JW, Avarbock MR, Brinster RL. Spermatogonial Stem Cell Self-Renewal Requires ETV5-Mediated Downstream Activation of Brachyury in Mice. Biol Reprod 2011; 85:1114-1123. [DOI:10.1095/biolreprod.111.091793]
3. Hofmann MC, Braydich-Stolle L, Dym M. Isolation of male germ-line stem cells; influence of GDNF. Dev Biol 2005; 279: 114-124. [DOI:10.1016/j.ydbio.2004.12.006]
4. Kubota H, Avarbock MR, Brinster RL. Growth factors essential for self-renewal and expansion of mouse spermatogonial stem cells. Proc Natl Acad Sci U S A 2004; 101: 16489-16494. [DOI:10.1073/pnas.0407063101]
5. Kanatsu-Shinohara M, Miki H, Inoue K, Ogonuki N, Toyokuni S, Ogura A, et al. Long-term culture of mouse male germline stem cells under serum-or feeder-free conditions. Biol Reprod 2005; 72: 985-991. [DOI:10.1095/biolreprod.104.036400]
6. Hermann BP, Sukhwani M, Lin CC, Sheng Y, Tomko J, Rodriguez M, et al. Characterization, cryopreservation, and ablation of spermatogonial stem cells in adult rhesus macaques. Stem Cells 2007; 25: 2330-2338. [DOI:10.1634/stemcells.2007-0143]
7. Clermont Y. The cycle of the seminiferous epithelium in man. Am J Anat 1963; 112: 35-51. [DOI:10.1002/aja.1001120103]
8. Clermont Y. Spermatogenesis in man. A study of the spermatogonial population. Fertil Steril 1966; 17: 705-721. [DOI:10.1016/S0015-0282(16)36120-9]
9. Clermont Y. Kinetics of spermatogenesis in mammals: seminiferous epithelium cycle and spermatogonial renewal. Physiol Rev 1972; 52: 198-236. [DOI:10.1152/physrev.1972.52.1.198]
10. Dym M, Kokkinaki M, He Z. Spermatogonial stem cells: mouse and human comparisons. Birth Defects Res C Embryo Today 2009; 87: 27-34. [DOI:10.1002/bdrc.20141]
11. Kanatsu-Shinohara M, Ogonuki N, Morimoto H, Ogura A, Shinohara T. Serum- and feeder-free culture of mouse germline stem cells. Biol Reprod 2011; 84: 97-105. [DOI:10.1095/biolreprod.110.086462]
12. Hermann BP, Sukhwani M, Simorangkir DR, Chu T, Plant TM, Orwig KE. Molecular dissection of the male germ cell lineage identifies putative spermatogonial stem cells in rhesus macaques. Hum Reprod 2009; 24: 1704-1716. [DOI:10.1093/humrep/dep073]
13. Seandel M, James D, Shmelkov SV, Falciatori I, Kim J, Chavala S, et al. Generation of functional multipotent adult stem cells from GPR125+ germline progenitors. Nature 2007; 449: 346-350. [DOI:10.1038/nature06129]
14. He Z, Kokkinaki M, Jiang J, Dobrinski I, Dym M. Isolation, characterization, and culture of human spermatogonia. Biol Reprod 2010; 82: 363-372. [DOI:10.1095/biolreprod.109.078550]
15. Meng X, Lindahl M, Hyvönen ME, Parvinen M, de Rooij DG, Hess MW, et al. Regulation of cell fate decision of undifferentiated spermatogonia by GDNF. Science 2000; 287: 1489-1493. [DOI:10.1126/science.287.5457.1489]
16. Brinster RL, Avarbock MR. Germline transmission of donor haplotype following spermatogonial transplantation. Proc Natl Acad Sci USA 1994; 91: 11303-11307. [DOI:10.1073/pnas.91.24.11303]
17. Brinster RL, Zimmermann JW. Spermatogenesis following male germ-cell transplantation. Proc Natl Acad Sci USA 1994; 91: 11298-11302. [DOI:10.1073/pnas.91.24.11298]
18. Dann CT, Alvarado AL, Molyneux LA, Denard BS, Garbers DL, Porteus MH. Spermatogonial stem cell self-renewal requires OCT4, a factor downregulated during retinoic acid-induced differentiation. Stem Cells 2008; 26: 2928-2937. [DOI:10.1634/stemcells.2008-0134]
19. Sadri-Ardekani H, Mizrak S, van Daalen S, Korver C, Roepers-Gajadien H, Koruji M, et al. Propagation of Human Spermatogonial Stem Cells In Vitro. JAMA 2009; 302: 2127-2134. [DOI:10.1001/jama.2009.1689]
20. Avarbock MR, Brinster CJ, Brinster RL. Reconstitution of spermatogenesis from frozen spermatogonial stem cells. Nat Med 1996; 2: 693-696. [DOI:10.1038/nm0696-693]
21. Mizrak SC, Chikhovskaya JV, Sadri-Ardekani H, van Daalen S, Korver CM, Hovingh SE, et al. Embryonic stem cell-like cells derived from adult human testis. Hum Reprod 2010; 25: 158-167. [DOI:10.1093/humrep/dep354]
22. Kanatsu-Shinohara M, Ogonuki N, Iwano T, Lee J, Kazuki Y, Inoue K, et al. Genetic and epigenetic properties of mouse male germline stem cells during long-term culture. Development 2005; 132: 4155-4163. [DOI:10.1242/dev.02004]
23. Ebata KT, Yeh JR, Zhang X, Nagano MC. The application of biomarkers of spermatogonial stem cells for restoring male fertility. Dis Markers 2008; 24: 267-276. [DOI:10.1155/2008/536020]
24. Costoya JA, Hobbs RM, Barna M, Cattoretti G, Manova K, Sukhwani M, et al. Essential role of Plzf in maintenance of spermatogonial stem cells. Nat Genet 2004; 36: 653-659. [DOI:10.1038/ng1367]
ارسال پیام به نویسنده مسئول
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
